中国比较医学杂志
中國比較醫學雜誌
중국비교의학잡지
CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
2011年
9期
13-18,后插三,后插四
,共8页
孙鹏%赵晨%燕丽%靳文静%张文新%李赞东
孫鵬%趙晨%燕麗%靳文靜%張文新%李讚東
손붕%조신%연려%근문정%장문신%리찬동
DT40细胞%血管微注射%基因表达%绿色荧光蛋白%鸡胚
DT40細胞%血管微註射%基因錶達%綠色熒光蛋白%鷄胚
DT40세포%혈관미주사%기인표체%록색형광단백%계배
目的 为了研究经过基因修饰的体细胞导入到禽类胚胎以后,供体细胞及外源基因是否能在受体胚胎中成活并且外源基因是否可以长期表达.方法 筛选得到稳定整合绿色荧光蛋白基因的鸡DT40细胞作为外源蛋白的运载工具,通过血管微注射的方法将其导入到于38.5℃温度条件下孵化65～70 h的鸡胚中,并将操作后的鸡胚在原孵化条件下继续孵化.在孵化的不同时期取移植了DT40细胞的嵌合体胚胎在荧光显微镜下观察荧光细胞的存活与分布情况.并通过PCR以及免疫组织化学方法检测供体细胞在受体中的位置以及绿色荧光蛋白的表达情况.结果 荧光标记的DT40细胞可以存活于受体不同的组织器官中,包括:脑、心脏、肝脏等.导入胚胎的整合外源基因的DT40细胞可以存活到胚胎出雏之前,并且外源基因能够正常表达.结论 可以通过此方法将外源基因导入到受体中,并使目的 蛋白在受体胚胎中持续表达,为胚胎期导入外源蛋白诱导免疫耐受的研究以及将转基因细胞移植到动物体内生产目的 蛋白的研究提供科学依据和技术平台.
目的 為瞭研究經過基因脩飾的體細胞導入到禽類胚胎以後,供體細胞及外源基因是否能在受體胚胎中成活併且外源基因是否可以長期錶達.方法 篩選得到穩定整閤綠色熒光蛋白基因的鷄DT40細胞作為外源蛋白的運載工具,通過血管微註射的方法將其導入到于38.5℃溫度條件下孵化65～70 h的鷄胚中,併將操作後的鷄胚在原孵化條件下繼續孵化.在孵化的不同時期取移植瞭DT40細胞的嵌閤體胚胎在熒光顯微鏡下觀察熒光細胞的存活與分佈情況.併通過PCR以及免疫組織化學方法檢測供體細胞在受體中的位置以及綠色熒光蛋白的錶達情況.結果 熒光標記的DT40細胞可以存活于受體不同的組織器官中,包括:腦、心髒、肝髒等.導入胚胎的整閤外源基因的DT40細胞可以存活到胚胎齣雛之前,併且外源基因能夠正常錶達.結論 可以通過此方法將外源基因導入到受體中,併使目的 蛋白在受體胚胎中持續錶達,為胚胎期導入外源蛋白誘導免疫耐受的研究以及將轉基因細胞移植到動物體內生產目的 蛋白的研究提供科學依據和技術平檯.
목적 위료연구경과기인수식적체세포도입도금류배태이후,공체세포급외원기인시부능재수체배태중성활병차외원기인시부가이장기표체.방법 사선득도은정정합록색형광단백기인적계DT40세포작위외원단백적운재공구,통과혈관미주사적방법장기도입도우38.5℃온도조건하부화65～70 h적계배중,병장조작후적계배재원부화조건하계속부화.재부화적불동시기취이식료DT40세포적감합체배태재형광현미경하관찰형광세포적존활여분포정황.병통과PCR이급면역조직화학방법검측공체세포재수체중적위치이급록색형광단백적표체정황.결과 형광표기적DT40세포가이존활우수체불동적조직기관중,포괄:뇌、심장、간장등.도입배태적정합외원기인적DT40세포가이존활도배태출추지전,병차외원기인능구정상표체.결론 가이통과차방법장외원기인도입도수체중,병사목적 단백재수체배태중지속표체,위배태기도입외원단백유도면역내수적연구이급장전기인세포이식도동물체내생산목적 단백적연구제공과학의거화기술평태.
