贵阳医学院学报
貴暘醫學院學報
귀양의학원학보
JOURNAL OF GUIYANG MEDICAL COLLEGE
2011年
4期
351-354,358
,共5页
庞实锋%付宏岐%郑克勤%曹定国%周汝滨
龐實鋒%付宏岐%鄭剋勤%曹定國%週汝濱
방실봉%부굉기%정극근%조정국%주여빈
酸性成纤维细胞生长因子%基因克隆%温控表达%聚含酶链反应
痠性成纖維細胞生長因子%基因剋隆%溫控錶達%聚含酶鏈反應
산성성섬유세포생장인자%기인극륭%온공표체%취함매련반응
目的:构建温控表达载体,采用温控表达haFGF,为降低其生产成本打下基础。方法:采用PCR法扩增截去其N端19个氨基酸的haFGF DNA,克隆到温控表达载体PBV220中,然后转化进BL21( DE3) Star plysS中进行温控表达。结果:经SDS-PAGE和Westernblot分析表明,温控表达载体表达的haFGF具有其原来的免疫原性,MTI活性检测结果表明,haFGF纯化产物与野生型haFGF活性相当,差异无显著性(P>0.05)。结论:成功构建了haFGF的温控表达载体,为提高目的蛋白的表达量和降低其生产成本打下基础。
目的:構建溫控錶達載體,採用溫控錶達haFGF,為降低其生產成本打下基礎。方法:採用PCR法擴增截去其N耑19箇氨基痠的haFGF DNA,剋隆到溫控錶達載體PBV220中,然後轉化進BL21( DE3) Star plysS中進行溫控錶達。結果:經SDS-PAGE和Westernblot分析錶明,溫控錶達載體錶達的haFGF具有其原來的免疫原性,MTI活性檢測結果錶明,haFGF純化產物與野生型haFGF活性相噹,差異無顯著性(P>0.05)。結論:成功構建瞭haFGF的溫控錶達載體,為提高目的蛋白的錶達量和降低其生產成本打下基礎。
목적:구건온공표체재체,채용온공표체haFGF,위강저기생산성본타하기출。방법:채용PCR법확증절거기N단19개안기산적haFGF DNA,극륭도온공표체재체PBV220중,연후전화진BL21( DE3) Star plysS중진행온공표체。결과:경SDS-PAGE화Westernblot분석표명,온공표체재체표체적haFGF구유기원래적면역원성,MTI활성검측결과표명,haFGF순화산물여야생형haFGF활성상당,차이무현저성(P>0.05)。결론:성공구건료haFGF적온공표체재체,위제고목적단백적표체량화강저기생산성본타하기출。