中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2001年
3期
311-314
,共4页
母敬郁%杨世杰%张培因%杨翰仪%麦荫乔%V.S.ANANTHANARAYANAN%边疆
母敬鬱%楊世傑%張培因%楊翰儀%麥蔭喬%V.S.ANANTHANARAYANAN%邊疆
모경욱%양세걸%장배인%양한의%맥음교%V.S.ANANTHANARAYANAN%변강
胰高血糖素%定点突变%园二色谱%结构%功能%钙离子
胰高血糖素%定點突變%園二色譜%結構%功能%鈣離子
이고혈당소%정점돌변%완이색보%결구%공능%개리자
胰高血糖素是由29个氨基酸组成的多肽激素，具有促糖元分解的生理功能，其拮抗剂有治疗糖尿病病人的潜在应用价值.在获得重组胰高血糖素基因工程菌基础上，利用定点突变技术改造其第21位氨基酸天冬氨酸为丙氨酸，并经DNA测序证明胰高血糖素基因发生了点突变.用IPTG诱导表达后，经亲和层析和反相高效液相层析，纯化到突变型重组21Ala-胰高血糖素.质谱测定分子量与理论值相符.利用园二色谱比较重组胰高血糖素和突变的21Ala-胰高血糖素在TFE中的二级结构，发现胰高血糖素以α螺旋为主要二级结构，21Ala-胰高血糖素仍有α螺旋结构特征，并且含量有所增大.利用兔升血糖试验，发现21Ala-胰高血糖素生物活性比重组胰高血糖素减少51％(P＜0.01).显示天然胰高血糖素第21位氨基酸天冬氨酸与形成α螺旋结构关系不大，但在发挥胰高血糖素的生物功能中有重要作用，与其可作为钙离子结合位点，参与胰高血糖素和受体结合的潜在功能密切相关.
胰高血糖素是由29箇氨基痠組成的多肽激素，具有促糖元分解的生理功能，其拮抗劑有治療糖尿病病人的潛在應用價值.在穫得重組胰高血糖素基因工程菌基礎上，利用定點突變技術改造其第21位氨基痠天鼕氨痠為丙氨痠，併經DNA測序證明胰高血糖素基因髮生瞭點突變.用IPTG誘導錶達後，經親和層析和反相高效液相層析，純化到突變型重組21Ala-胰高血糖素.質譜測定分子量與理論值相符.利用園二色譜比較重組胰高血糖素和突變的21Ala-胰高血糖素在TFE中的二級結構，髮現胰高血糖素以α螺鏇為主要二級結構，21Ala-胰高血糖素仍有α螺鏇結構特徵，併且含量有所增大.利用兔升血糖試驗，髮現21Ala-胰高血糖素生物活性比重組胰高血糖素減少51％(P＜0.01).顯示天然胰高血糖素第21位氨基痠天鼕氨痠與形成α螺鏇結構關繫不大，但在髮揮胰高血糖素的生物功能中有重要作用，與其可作為鈣離子結閤位點，參與胰高血糖素和受體結閤的潛在功能密切相關.
이고혈당소시유29개안기산조성적다태격소，구유촉당원분해적생리공능，기길항제유치료당뇨병병인적잠재응용개치.재획득중조이고혈당소기인공정균기출상，이용정점돌변기술개조기제21위안기산천동안산위병안산，병경DNA측서증명이고혈당소기인발생료점돌변.용IPTG유도표체후，경친화층석화반상고효액상층석，순화도돌변형중조21Ala-이고혈당소.질보측정분자량여이론치상부.이용완이색보비교중조이고혈당소화돌변적21Ala-이고혈당소재TFE중적이급결구，발현이고혈당소이α라선위주요이급결구，21Ala-이고혈당소잉유α라선결구특정，병차함량유소증대.이용토승혈당시험，발현21Ala-이고혈당소생물활성비중조이고혈당소감소51％(P＜0.01).현시천연이고혈당소제21위안기산천동안산여형성α라선결구관계불대，단재발휘이고혈당소적생물공능중유중요작용，여기가작위개리자결합위점，삼여이고혈당소화수체결합적잠재공능밀절상관.
