CAJ | 학술논문

目的克隆A亚型人呼吸道合胞病毒(HRSV)G基因,构建G基因的真核表达载体,并进行表达和鉴定.方法自行设计引物,利用RT-PCR技术,从感染HRSV的HEp-2细胞中获得G基因片段,克隆到pGEM-T easy载体,经核酸序列分析,进一步亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+),酶切鉴定后,脂质体法转染COS-7细胞,RT-PCR和Western blotting鉴定基因转录和蛋白表达.结果真核表达载体pcDNA3.1(+)G的限制性内切酶分析结果与预期一致,基因序列分析显示没有发生无义突变.转染COS-7细胞后,RT-PCR检测到G基因有转录,Western blotting分析观察到G蛋白特异性的表达条带.结论成功克隆A亚型HRSV G基因,并在真核细胞中获得表达.
목적극륭A아형인호흡도합포병독(HRSV)G기인,구건G기인적진핵표체재체,병진행표체화감정.방법자행설계인물,이용RT-PCR기술,종감염HRSV적HEp-2세포중획득G기인편단,극륭도pGEM-T easy재체,경핵산서렬분석,진일보아극륭도진핵표체재체pcDNA3.1(+),매절감정후,지질체법전염COS-7세포,RT-PCR화Western blotting감정기인전록화단백표체.결과진핵표체재체pcDNA3.1(+)G적한제성내절매분석결과여예기일치,기인서렬분석현시몰유발생무의돌변.전염COS-7세포후,RT-PCR검측도G기인유전록,Western blotting분석관찰도G단백특이성적표체조대.결론성공극륭A아형HRSV G기인,병재진핵세포중획득표체.