生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
13-15
,共3页
刘晓颖%陈芸%苗玉青%李冠
劉曉穎%陳蕓%苗玉青%李冠
류효영%진예%묘옥청%리관
基因克隆%载体构建%玉米醇溶蛋白
基因剋隆%載體構建%玉米醇溶蛋白
기인극륭%재체구건%옥미순용단백
由于紫花苜蓿中的含硫氨基酸水平很低,采用基因工程手段将富硫蛋白基因-10kD玉米醇溶蛋白(zein)基因转入苜蓿中以提高其水平.根据该基因的保守序列设计引物,并在下游引物终止密码子前引入内质网驻留蛋白信号序列(KDEL),通过PCR技术从玉米(Zea mays L.)黄化幼苗基因组中扩增目的基因的开放阅读框(ORF).序列测序得到全长为465bp的目的片断,该片段编码154个氨基酸,其中甲硫氨酸(M)31个占20.13%,半胱氨酸(C)6个占3.90%,含硫氨基酸共占24.03%.该基因与报道的10kD玉米醇溶蛋基因具有很高的同源性.将该基因构建到植物表达载体pCAMBIA13011上,以转化紫花苜蓿提高其含硫氨基酸的水平.
由于紫花苜蓿中的含硫氨基痠水平很低,採用基因工程手段將富硫蛋白基因-10kD玉米醇溶蛋白(zein)基因轉入苜蓿中以提高其水平.根據該基因的保守序列設計引物,併在下遊引物終止密碼子前引入內質網駐留蛋白信號序列(KDEL),通過PCR技術從玉米(Zea mays L.)黃化幼苗基因組中擴增目的基因的開放閱讀框(ORF).序列測序得到全長為465bp的目的片斷,該片段編碼154箇氨基痠,其中甲硫氨痠(M)31箇佔20.13%,半胱氨痠(C)6箇佔3.90%,含硫氨基痠共佔24.03%.該基因與報道的10kD玉米醇溶蛋基因具有很高的同源性.將該基因構建到植物錶達載體pCAMBIA13011上,以轉化紫花苜蓿提高其含硫氨基痠的水平.
유우자화목숙중적함류안기산수평흔저,채용기인공정수단장부류단백기인-10kD옥미순용단백(zein)기인전입목숙중이제고기수평.근거해기인적보수서렬설계인물,병재하유인물종지밀마자전인입내질망주류단백신호서렬(KDEL),통과PCR기술종옥미(Zea mays L.)황화유묘기인조중확증목적기인적개방열독광(ORF).서렬측서득도전장위465bp적목적편단,해편단편마154개안기산,기중갑류안산(M)31개점20.13%,반광안산(C)6개점3.90%,함류안기산공점24.03%.해기인여보도적10kD옥미순용단기인구유흔고적동원성.장해기인구건도식물표체재체pCAMBIA13011상,이전화자화목숙제고기함류안기산적수평.
