温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2008年
6期
502-506
,共5页
姚蔚%周建娟%李桂军%谢旦立%楼永良
姚蔚%週建娟%李桂軍%謝旦立%樓永良
요위%주건연%리계군%사단립%루영량
创伤弧菌溶细胞素%多克隆抗体%保护作用%阻断作用
創傷弧菌溶細胞素%多剋隆抗體%保護作用%阻斷作用
창상호균용세포소%다극륭항체%보호작용%조단작용
目的:纯化rVVC免疫家免,制备并纯化多克隆抗体.观察复性rVVC、纯化多克隆抗体、rVVC和纯化多克隆抗体混合作用肝癌细胞SMMC7721后,肝癌细胞SMMC7721形态学和活性变化,评估抗重组rVVC蛋白多克隆抗体对肝癌细胞SMMC772的保护作用.方法:纯化重组蛋白rVVC免疫日本大耳免获得多克隆抗体,多克隆抗体经过硫酸铵盐析、Sephadex G25除盐和DEAE-Sephadex G100层析纯化并进行Westerm Blot鉴定和抗体效价分析.复性rVVC、纯化多克隆抗体、rVVC和纯化多克隆抗体混合物作用肝癌细胞SMMC7721后,显微镜观察并以MTT法确定抗重组rVVC蛋白多克隆抗体对肝癌细胞SMMC7721的保护作用.结果:兔抗重组rVVC多克隆抗体经盐析法,分子筛和阴离子交换层析法纯化后,得到较纯的IgG分子.免疫印迹结果显示,抗重组rVVC蛋白多克隆抗体与纯化抗原呈现特异性反应条带.显微镜观察和MTT结果表明,纯化多克隆抗体能够阻断重组rVVC活性蛋白对肝癌细胞SMMC772的损伤.结论:成功制备了具有保护和阻断作用的兔抗重组rVVC多克隆抗体,为以后rVVC促炎症、促应激作用机制和信号传导机制研究提供一个重要的阻断剂.
目的:純化rVVC免疫傢免,製備併純化多剋隆抗體.觀察複性rVVC、純化多剋隆抗體、rVVC和純化多剋隆抗體混閤作用肝癌細胞SMMC7721後,肝癌細胞SMMC7721形態學和活性變化,評估抗重組rVVC蛋白多剋隆抗體對肝癌細胞SMMC772的保護作用.方法:純化重組蛋白rVVC免疫日本大耳免穫得多剋隆抗體,多剋隆抗體經過硫痠銨鹽析、Sephadex G25除鹽和DEAE-Sephadex G100層析純化併進行Westerm Blot鑒定和抗體效價分析.複性rVVC、純化多剋隆抗體、rVVC和純化多剋隆抗體混閤物作用肝癌細胞SMMC7721後,顯微鏡觀察併以MTT法確定抗重組rVVC蛋白多剋隆抗體對肝癌細胞SMMC7721的保護作用.結果:兔抗重組rVVC多剋隆抗體經鹽析法,分子篩和陰離子交換層析法純化後,得到較純的IgG分子.免疫印跡結果顯示,抗重組rVVC蛋白多剋隆抗體與純化抗原呈現特異性反應條帶.顯微鏡觀察和MTT結果錶明,純化多剋隆抗體能夠阻斷重組rVVC活性蛋白對肝癌細胞SMMC772的損傷.結論:成功製備瞭具有保護和阻斷作用的兔抗重組rVVC多剋隆抗體,為以後rVVC促炎癥、促應激作用機製和信號傳導機製研究提供一箇重要的阻斷劑.
목적:순화rVVC면역가면,제비병순화다극륭항체.관찰복성rVVC、순화다극륭항체、rVVC화순화다극륭항체혼합작용간암세포SMMC7721후,간암세포SMMC7721형태학화활성변화,평고항중조rVVC단백다극륭항체대간암세포SMMC772적보호작용.방법:순화중조단백rVVC면역일본대이면획득다극륭항체,다극륭항체경과류산안염석、Sephadex G25제염화DEAE-Sephadex G100층석순화병진행Westerm Blot감정화항체효개분석.복성rVVC、순화다극륭항체、rVVC화순화다극륭항체혼합물작용간암세포SMMC7721후,현미경관찰병이MTT법학정항중조rVVC단백다극륭항체대간암세포SMMC7721적보호작용.결과:토항중조rVVC다극륭항체경염석법,분자사화음리자교환층석법순화후,득도교순적IgG분자.면역인적결과현시,항중조rVVC단백다극륭항체여순화항원정현특이성반응조대.현미경관찰화MTT결과표명,순화다극륭항체능구조단중조rVVC활성단백대간암세포SMMC772적손상.결론:성공제비료구유보호화조단작용적토항중조rVVC다극륭항체,위이후rVVC촉염증、촉응격작용궤제화신호전도궤제연구제공일개중요적조단제.