中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
2008年
10期
1133-1136,1140
,共5页
朱秀同%崔治中%孙淑红%娄本红
硃秀同%崔治中%孫淑紅%婁本紅
주수동%최치중%손숙홍%루본홍
1BDV%细胞适应毒%鸡体传代毒%致病性%VP5
1BDV%細胞適應毒%鷄體傳代毒%緻病性%VP5
1BDV%세포괄응독%계체전대독%치병성%VP5
传染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)的超强毒株GX8/99经在鸡胚成纤维细胞(CEF)上连续盲传23代后,细胞适应毒株GXC23时鸡的致病性显著减弱,对4~6周龄SPF鸡的致死率从85%~90%减为0~5%.GXC23在96孔细胞培养板上经2次无限稀释法后得到3个克隆病毒.经SPF鸡回传20代后,相应的毒株GX-2820、GX-4820、GX-5820对SPF鸡的致死率仍维持在0~5%.序列比较表明,GX8/99在传代过程中,其细胞适应毒GXC23有8个碱基突变,其中5个碱基突变导致了氨基酸改变.bp#2 T→C突变,导致传代毒ORF中的起始编码子后移了4个氨基酸.而3个克隆化病毒回鸡20代后致病性不变,这几个位点也保持不变,且与3个疫苗株完全一致.进一步分析表明,有4个超强毒株和4个强毒株的VP5基因的5个位点与GX8/99原始毒相同,而另3个超强毒及6个强毒株与细胞适应毒GXC23一致.这些结果表明,超强毒GX8/99在细胞传代过程中VP5基因上5个氨基酸的变异主要与适应细胞培养相关而与致病性无关.
傳染性法氏囊病病毒(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)的超彊毒株GX8/99經在鷄胚成纖維細胞(CEF)上連續盲傳23代後,細胞適應毒株GXC23時鷄的緻病性顯著減弱,對4~6週齡SPF鷄的緻死率從85%~90%減為0~5%.GXC23在96孔細胞培養闆上經2次無限稀釋法後得到3箇剋隆病毒.經SPF鷄迴傳20代後,相應的毒株GX-2820、GX-4820、GX-5820對SPF鷄的緻死率仍維持在0~5%.序列比較錶明,GX8/99在傳代過程中,其細胞適應毒GXC23有8箇堿基突變,其中5箇堿基突變導緻瞭氨基痠改變.bp#2 T→C突變,導緻傳代毒ORF中的起始編碼子後移瞭4箇氨基痠.而3箇剋隆化病毒迴鷄20代後緻病性不變,這幾箇位點也保持不變,且與3箇疫苗株完全一緻.進一步分析錶明,有4箇超彊毒株和4箇彊毒株的VP5基因的5箇位點與GX8/99原始毒相同,而另3箇超彊毒及6箇彊毒株與細胞適應毒GXC23一緻.這些結果錶明,超彊毒GX8/99在細胞傳代過程中VP5基因上5箇氨基痠的變異主要與適應細胞培養相關而與緻病性無關.
전염성법씨낭병병독(Infectious Bursal Diseas Virus,IBDV)적초강독주GX8/99경재계배성섬유세포(CEF)상련속맹전23대후,세포괄응독주GXC23시계적치병성현저감약,대4~6주령SPF계적치사솔종85%~90%감위0~5%.GXC23재96공세포배양판상경2차무한희석법후득도3개극륭병독.경SPF계회전20대후,상응적독주GX-2820、GX-4820、GX-5820대SPF계적치사솔잉유지재0~5%.서렬비교표명,GX8/99재전대과정중,기세포괄응독GXC23유8개감기돌변,기중5개감기돌변도치료안기산개변.bp#2 T→C돌변,도치전대독ORF중적기시편마자후이료4개안기산.이3개극륭화병독회계20대후치병성불변,저궤개위점야보지불변,차여3개역묘주완전일치.진일보분석표명,유4개초강독주화4개강독주적VP5기인적5개위점여GX8/99원시독상동,이령3개초강독급6개강독주여세포괄응독GXC23일치.저사결과표명,초강독GX8/99재세포전대과정중VP5기인상5개안기산적변이주요여괄응세포배양상관이여치병성무관.