植物生理学通讯
植物生理學通訊
식물생이학통신
PLANT PHYSIOLOGY COMMUNICATIONS
2008年
5期
860-864
,共5页
孟凡荣%司志飞%刘昊英%张问%李永春%尹钧
孟凡榮%司誌飛%劉昊英%張問%李永春%尹鈞
맹범영%사지비%류호영%장문%리영춘%윤균
小麦%TaMBD2%原核表述
小麥%TaMBD2%原覈錶述
소맥%TaMBD2%원핵표술
构建了小麦甲基结合域蛋白基因TaMBD2的原核表达载体pGEX-TaMBD2,并在大肠杆菌BL21(DE3)工程菌株中优化了融合蛋白GST-TaMBD2的诱导表达条件.结果表明,用0.3、0.5和1.0 mm01.L-1的IPTG诱导后,融合蛋白GST-TaMBD2均能有效表达,以1.0mmol·L-1IPTG诱导的效果最好;从诱导表达的时间来看,3种浓度IPTG诱导1 h后融合蛋白均开始表达,且表达量随着诱导时间的延长而逐渐增加,但在诱导6 h后的表达量增加幅度不大,因此确定诱导融合蛋白GST-TaMBD2表达的最佳IPTG浓度为1.0 mm01.L-1诱导时间为6 h.
構建瞭小麥甲基結閤域蛋白基因TaMBD2的原覈錶達載體pGEX-TaMBD2,併在大腸桿菌BL21(DE3)工程菌株中優化瞭融閤蛋白GST-TaMBD2的誘導錶達條件.結果錶明,用0.3、0.5和1.0 mm01.L-1的IPTG誘導後,融閤蛋白GST-TaMBD2均能有效錶達,以1.0mmol·L-1IPTG誘導的效果最好;從誘導錶達的時間來看,3種濃度IPTG誘導1 h後融閤蛋白均開始錶達,且錶達量隨著誘導時間的延長而逐漸增加,但在誘導6 h後的錶達量增加幅度不大,因此確定誘導融閤蛋白GST-TaMBD2錶達的最佳IPTG濃度為1.0 mm01.L-1誘導時間為6 h.
구건료소맥갑기결합역단백기인TaMBD2적원핵표체재체pGEX-TaMBD2,병재대장간균BL21(DE3)공정균주중우화료융합단백GST-TaMBD2적유도표체조건.결과표명,용0.3、0.5화1.0 mm01.L-1적IPTG유도후,융합단백GST-TaMBD2균능유효표체,이1.0mmol·L-1IPTG유도적효과최호;종유도표체적시간래간,3충농도IPTG유도1 h후융합단백균개시표체,차표체량수착유도시간적연장이축점증가,단재유도6 h후적표체량증가폭도불대,인차학정유도융합단백GST-TaMBD2표체적최가IPTG농도위1.0 mm01.L-1유도시간위6 h.
