基因组学与应用生物学
基因組學與應用生物學
기인조학여응용생물학
GENOMICS AND APPLIED BIOLOGY
2010年
3期
588-592
,共5页
岑卫健%姜伯乐%杨超%王金子%杨丽超%何勇强%唐纪良
岑衛健%薑伯樂%楊超%王金子%楊麗超%何勇彊%唐紀良
잠위건%강백악%양초%왕금자%양려초%하용강%당기량
野油菜黄单胞菌%分泌组%双向电泳%丙酮沉淀法%2D试剂盒纯化法
野油菜黃單胞菌%分泌組%雙嚮電泳%丙酮沉澱法%2D試劑盒純化法
야유채황단포균%분비조%쌍향전영%병동침정법%2D시제합순화법
野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是十字花科植物黑腐病的病原细菌.我们建立了Xcc的蛋白质组学研究平台,用于分离、鉴定该菌的致病相关蛋白.为了减少胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)对蛋白材料质量的影响,我们构建了EPS缺陷的Xcc 8004ΔgumB突变体.本研究以Xcc 8004ΔgumB出发菌株,用诱导培养液培养,取细胞上清通过超滤浓缩得到蛋白质粗提物,分别采用丙酮沉淀法、试剂盒纯化法和丙酮沉淀-试剂盒联用法来纯化蛋白质粗提物,通过比较双向电泳的结果优选最佳的样品制各方法.结果证明丙酮沉淀-试剂盒联用法较为理想,所得双向电泳图片清晰,分辨率高.因此,此方法可以用于制备野油菜黄单胞菌分泌组双向电泳样品,并可以满足进一步研究的需要.
野油菜黃單胞菌野油菜緻病變種(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)是十字花科植物黑腐病的病原細菌.我們建立瞭Xcc的蛋白質組學研究平檯,用于分離、鑒定該菌的緻病相關蛋白.為瞭減少胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)對蛋白材料質量的影響,我們構建瞭EPS缺陷的Xcc 8004ΔgumB突變體.本研究以Xcc 8004ΔgumB齣髮菌株,用誘導培養液培養,取細胞上清通過超濾濃縮得到蛋白質粗提物,分彆採用丙酮沉澱法、試劑盒純化法和丙酮沉澱-試劑盒聯用法來純化蛋白質粗提物,通過比較雙嚮電泳的結果優選最佳的樣品製各方法.結果證明丙酮沉澱-試劑盒聯用法較為理想,所得雙嚮電泳圖片清晰,分辨率高.因此,此方法可以用于製備野油菜黃單胞菌分泌組雙嚮電泳樣品,併可以滿足進一步研究的需要.
야유채황단포균야유채치병변충(Xanthomonas campestris pv.campestris,Xcc)시십자화과식물흑부병적병원세균.아문건립료Xcc적단백질조학연구평태,용우분리、감정해균적치병상관단백.위료감소포외다당(exopolysaccharide,EPS)대단백재료질량적영향,아문구건료EPS결함적Xcc 8004ΔgumB돌변체.본연구이Xcc 8004ΔgumB출발균주,용유도배양액배양,취세포상청통과초려농축득도단백질조제물,분별채용병동침정법、시제합순화법화병동침정-시제합련용법래순화단백질조제물,통과비교쌍향전영적결과우선최가적양품제각방법.결과증명병동침정-시제합련용법교위이상,소득쌍향전영도편청석,분변솔고.인차,차방법가이용우제비야유채황단포균분비조쌍향전영양품,병가이만족진일보연구적수요.
