CAJ | 학술논문

目的建立一种新的细胞周期特异性凋亡检测方法.方法将急性早幼粒细胞白血病细胞株(HL-60)分别经喜树碱(CAM)、紫外线诱导,及喜树碱和N-甲苯磺酰基-L-苯基丙氨酸氯甲基酮(TPCK)共同诱导后,用异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白V(Annexin V)进行标记,进行标记，经1%不含甲醇的甲醛溶液冰浴固定,再用含洋地黄皂苷的碘化丙啶染色液染色后,流式细胞术分析凋亡细胞的周期特异性和细胞凋亡率,并与DNA链缺口标记法(TdT)和常规Annexin V法检测结果进行比较.结果细胞凋亡的周期特异性分析:膜联蛋白V/碘化丙啶法(PA法)和TdT法结果一致,CAM和紫外线诱导的细胞凋亡分别发生在S期和G1期;CAM 和TPCK共同诱导试验显示,PA法对早期凋亡具有较高的检测灵敏度,TdT法则不能有效检测;而常规Annexin V法无法进行凋亡细胞的周期特异性分析.细胞凋亡率的检测:HL-60经CAM、紫外线、CAM与TPCK 三种方法诱导后,PA法检测凋亡率的结果(17.3%、34.7%、35.9%)与常规Annexin V法的检测结果(18.1%、35.6%、37.0%)一致(P>0.05),而TdT法(10.7%、19.5%、-)则明显偏低(P<0.01).结论 PA法可以用于凋亡细胞周期特异性检测,其稳定、可靠、灵敏度高.
목적건립일충신적세포주기특이성조망검측방법.방법장급성조유립세포백혈병세포주(HL-60)분별경희수감(CAM)、자외선유도,급희수감화N-갑분광선기-L-분기병안산록갑기동(TPCK)공동유도후,용이류청산형광소표기적막련단백V(Annexin V)진행표기,진행표기，경1%불함갑순적갑철용액빙욕고정,재용함양지황조감적전화병정염색액염색후,류식세포술분석조망세포적주기특이성화세포조망솔,병여DNA련결구표기법(TdT)화상규Annexin V법검측결과진행비교.결과세포조망적주기특이성분석:막련단백V/전화병정법(PA법)화TdT법결과일치,CAM화자외선유도적세포조망분별발생재S기화G1기;CAM 화TPCK공동유도시험현시,PA법대조기조망구유교고적검측령민도,TdT법칙불능유효검측;이상규Annexin V법무법진행조망세포적주기특이성분석.세포조망솔적검측:HL-60경CAM、자외선、CAM여TPCK 삼충방법유도후,PA법검측조망솔적결과(17.3%、34.7%、35.9%)여상규Annexin V법적검측결과(18.1%、35.6%、37.0%)일치(P>0.05),이TdT법(10.7%、19.5%、-)칙명현편저(P<0.01).결론 PA법가이용우조망세포주기특이성검측,기은정、가고、령민도고.