中华微生物学和免疫学杂志
中華微生物學和免疫學雜誌
중화미생물학화면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF MICROBIOLOGY AND IMMUNOLOGY
1999年
2期
129-132
,共4页
殷际义%崔莲仙%赵庆%张正健%袁勃
慇際義%崔蓮仙%趙慶%張正健%袁勃
은제의%최련선%조경%장정건%원발
扁桃体%B淋巴细胞%聚合酶链反应%Northern分析
扁桃體%B淋巴細胞%聚閤酶鏈反應%Northern分析
편도체%B림파세포%취합매련반응%Northern분석
目的 分离新的B细胞活化基因.方法 采用差异显示反转录PCR技术(DDRT-PCR)对人扁桃体活化和静止B细胞mRNA的差异显示情况进行分析,对显示片段进行克隆并行Northern分析,对Northern杂交阳性的cDNA片段进行测序并比较同源性.结果 差异显示分析共获得明显差异表达的cDNA片段62条,选择主要表达于活化B细胞上的20条cDNA片段克隆到pGEM-T载体上,并逐一对静止和活化B细胞RNA进行Northern分析,其中6条cDNA片段在活化B细胞中呈Northern杂交阳性且与差异显示情况相符, 对它们进行测序,然后通过国际互联网与GenBank, EMBL和DDBJ的DNA数据库比较序列同源性,发现其中4个克隆与已发现的基因具明显同源性,一个克隆是新的, 另一个克隆虽然与人T细胞分泌的趋化因子I-309同源性达95%,但二者转录本不同.结论 通过DDRT-PCR分离到两个可能为新的B细胞活化基因的cDNA片段,这为进一步克隆新的B细胞活化基因奠定了基础.
目的 分離新的B細胞活化基因.方法 採用差異顯示反轉錄PCR技術(DDRT-PCR)對人扁桃體活化和靜止B細胞mRNA的差異顯示情況進行分析,對顯示片段進行剋隆併行Northern分析,對Northern雜交暘性的cDNA片段進行測序併比較同源性.結果 差異顯示分析共穫得明顯差異錶達的cDNA片段62條,選擇主要錶達于活化B細胞上的20條cDNA片段剋隆到pGEM-T載體上,併逐一對靜止和活化B細胞RNA進行Northern分析,其中6條cDNA片段在活化B細胞中呈Northern雜交暘性且與差異顯示情況相符, 對它們進行測序,然後通過國際互聯網與GenBank, EMBL和DDBJ的DNA數據庫比較序列同源性,髮現其中4箇剋隆與已髮現的基因具明顯同源性,一箇剋隆是新的, 另一箇剋隆雖然與人T細胞分泌的趨化因子I-309同源性達95%,但二者轉錄本不同.結論 通過DDRT-PCR分離到兩箇可能為新的B細胞活化基因的cDNA片段,這為進一步剋隆新的B細胞活化基因奠定瞭基礎.
목적 분리신적B세포활화기인.방법 채용차이현시반전록PCR기술(DDRT-PCR)대인편도체활화화정지B세포mRNA적차이현시정황진행분석,대현시편단진행극륭병행Northern분석,대Northern잡교양성적cDNA편단진행측서병비교동원성.결과 차이현시분석공획득명현차이표체적cDNA편단62조,선택주요표체우활화B세포상적20조cDNA편단극륭도pGEM-T재체상,병축일대정지화활화B세포RNA진행Northern분석,기중6조cDNA편단재활화B세포중정Northern잡교양성차여차이현시정황상부, 대타문진행측서,연후통과국제호련망여GenBank, EMBL화DDBJ적DNA수거고비교서렬동원성,발현기중4개극륭여이발현적기인구명현동원성,일개극륭시신적, 령일개극륭수연여인T세포분비적추화인자I-309동원성체95%,단이자전록본불동.결론 통과DDRT-PCR분리도량개가능위신적B세포활화기인적cDNA편단,저위진일보극륭신적B세포활화기인전정료기출.
