中华劳动卫生职业病杂志
中華勞動衛生職業病雜誌
중화노동위생직업병잡지
CHINESE JOURNAL OF INDUSTRIAL HYGIENE AND OCCUPATIONAL DISEASES
2003年
2期
105-107
,共3页
刘起展%庄志雄%江高峰%何云%杜柳涛
劉起展%莊誌雄%江高峰%何雲%杜柳濤
류기전%장지웅%강고봉%하운%두류도
DNA损伤%RNA,反义%印迹法,蛋白质%hKu70基因
DNA損傷%RNA,反義%印跡法,蛋白質%hKu70基因
DNA손상%RNA,반의%인적법,단백질%hKu70기인
目的建立并鉴定DNA双链断裂(DSB)修复蛋白hKu70缺陷细胞株,并观察该缺陷细胞的某些生物学效应,用于hKu70基因功能及职业有害因素对DNA双链断裂修复影响的研究.方法用构建的hKu70基因反义RNA绿色荧光蛋白真核表达载体(pEGFP-C1-K)转染人胚肺成纤维细胞(HLF),用蛋白免疫印迹法鉴定转染细胞中hKu70基因的表达水平.同时观察转染细胞生长形态,绘制生长曲线,软琼脂培养法鉴定恶性程度.结果pEGFP-C1-K载体在转染细胞内可较稳定表达,hKu70蛋白缺陷细胞株hKu70基因的蛋白表达水平下降了42%,转染后hKu70蛋白缺陷细胞生长形态、生长速度无明显变化,软琼脂培养未见细胞集落.结论成功建立和鉴定了hKu70蛋白缺陷细胞株,该缺陷不足以单独引起可观察的某些生物学效应.
目的建立併鑒定DNA雙鏈斷裂(DSB)脩複蛋白hKu70缺陷細胞株,併觀察該缺陷細胞的某些生物學效應,用于hKu70基因功能及職業有害因素對DNA雙鏈斷裂脩複影響的研究.方法用構建的hKu70基因反義RNA綠色熒光蛋白真覈錶達載體(pEGFP-C1-K)轉染人胚肺成纖維細胞(HLF),用蛋白免疫印跡法鑒定轉染細胞中hKu70基因的錶達水平.同時觀察轉染細胞生長形態,繪製生長麯線,軟瓊脂培養法鑒定噁性程度.結果pEGFP-C1-K載體在轉染細胞內可較穩定錶達,hKu70蛋白缺陷細胞株hKu70基因的蛋白錶達水平下降瞭42%,轉染後hKu70蛋白缺陷細胞生長形態、生長速度無明顯變化,軟瓊脂培養未見細胞集落.結論成功建立和鑒定瞭hKu70蛋白缺陷細胞株,該缺陷不足以單獨引起可觀察的某些生物學效應.
목적건립병감정DNA쌍련단렬(DSB)수복단백hKu70결함세포주,병관찰해결함세포적모사생물학효응,용우hKu70기인공능급직업유해인소대DNA쌍련단렬수복영향적연구.방법용구건적hKu70기인반의RNA록색형광단백진핵표체재체(pEGFP-C1-K)전염인배폐성섬유세포(HLF),용단백면역인적법감정전염세포중hKu70기인적표체수평.동시관찰전염세포생장형태,회제생장곡선,연경지배양법감정악성정도.결과pEGFP-C1-K재체재전염세포내가교은정표체,hKu70단백결함세포주hKu70기인적단백표체수평하강료42%,전염후hKu70단백결함세포생장형태、생장속도무명현변화,연경지배양미견세포집락.결론성공건립화감정료hKu70단백결함세포주,해결함불족이단독인기가관찰적모사생물학효응.
