中国实用医药
中國實用醫藥
중국실용의약
CHINA PRACTICAL MEDICAL
2012年
33期
8-10
,共3页
stat3%RNA干扰%siRNA
stat3%RNA榦擾%siRNA
stat3%RNA간우%siRNA
目的 设计和构建针对stat3基因的siRNA表达框架,并在肝癌细胞中观察其干扰效果.方法 stat3合成并修饰靶序列后PCR扩增siRNA表达框架,通过脂质体介导,直接将扩增产物转染至肝癌细胞HepG2中,48 h后提取细胞总RNA进行RT-PCR和Western blot检测干扰效果.结果 RT-PCR结果显示HepG2细胞内靶基因sTAT3 mRNA水平比空白组和阴性对照组明显下降(P<0.01).流式细胞仪结果显示,转染stat3-siRNA的细胞与阴性对照组、空白对照组比较在G1期出现明显阻滞,在G1期出现的阻滞为(78.17±21.73)%,凋亡率达(21.39±9.47)%,与空白组和阴性对照组比较有明显差异(P<0.01).结论 本实验成功设计并构建的siRNA表达框架能干扰人肝癌HepG2细胞内sTAT3基因的表达.
目的 設計和構建針對stat3基因的siRNA錶達框架,併在肝癌細胞中觀察其榦擾效果.方法 stat3閤成併脩飾靶序列後PCR擴增siRNA錶達框架,通過脂質體介導,直接將擴增產物轉染至肝癌細胞HepG2中,48 h後提取細胞總RNA進行RT-PCR和Western blot檢測榦擾效果.結果 RT-PCR結果顯示HepG2細胞內靶基因sTAT3 mRNA水平比空白組和陰性對照組明顯下降(P<0.01).流式細胞儀結果顯示,轉染stat3-siRNA的細胞與陰性對照組、空白對照組比較在G1期齣現明顯阻滯,在G1期齣現的阻滯為(78.17±21.73)%,凋亡率達(21.39±9.47)%,與空白組和陰性對照組比較有明顯差異(P<0.01).結論 本實驗成功設計併構建的siRNA錶達框架能榦擾人肝癌HepG2細胞內sTAT3基因的錶達.
목적 설계화구건침대stat3기인적siRNA표체광가,병재간암세포중관찰기간우효과.방법 stat3합성병수식파서렬후PCR확증siRNA표체광가,통과지질체개도,직접장확증산물전염지간암세포HepG2중,48 h후제취세포총RNA진행RT-PCR화Western blot검측간우효과.결과 RT-PCR결과현시HepG2세포내파기인sTAT3 mRNA수평비공백조화음성대조조명현하강(P<0.01).류식세포의결과현시,전염stat3-siRNA적세포여음성대조조、공백대조조비교재G1기출현명현조체,재G1기출현적조체위(78.17±21.73)%,조망솔체(21.39±9.47)%,여공백조화음성대조조비교유명현차이(P<0.01).결론 본실험성공설계병구건적siRNA표체광가능간우인간암HepG2세포내sTAT3기인적표체.
