医学分子生物学杂志
醫學分子生物學雜誌
의학분자생물학잡지
FOREIGN MEDICAL SCIENCES
2010年
3期
199-205
,共7页
高红%伍美%张志波%姜中佳%苏真伟%黄英
高紅%伍美%張誌波%薑中佳%囌真偉%黃英
고홍%오미%장지파%강중가%소진위%황영
先天性巨结肠症%谷胱苷肽-S-转移酶%基因的表达与调控
先天性巨結腸癥%穀胱苷肽-S-轉移酶%基因的錶達與調控
선천성거결장증%곡광감태-S-전이매%기인적표체여조공
目的 利用双向凝胶电泳-基质辅助激光解吸离子化飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技术进行先天性巨结肠症(hirschsprung disease,HD)中蛋白质表达谱的研究;寻找HD中的生物标志物,为临床HD的早期无创性诊断提供依据.方法 分别提取20例HD患者配对狭窄段及正常段肠管组织的总蛋白质,进行双向凝胶电泳、银染,两组凝胶图像差异分析,得到差异蛋白质.对目的谷胱苷肽-S-转移酶1(glutathione S-transferase pi,GSTP1)蛋白质进行MALDI-TOF-MS质谱分析.运用甲基化特异性聚合酶链反应方法检测HD中GSTP1基因启动子区5′端 CpG 岛甲基化程度与表达.采用荧光实时定量PCR方法检测HD中GSTP1基因的mRNA 转录水平.结果 获得了分辨率较高的HD狭窄段及正常段肠管组织双向凝胶电泳图谱;得到阳性结果的差异蛋白质谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST).MSP 检测48 例HD,其中狭窄段肠管组织GSTP1基因高甲基化41例;而正常段肠管组织GSTP1基因甲基化仅7例.HD狭窄段肠管组织GSTP1基因mRNA表达低于正常段肠管组织(P<0.05).结论 利用双向凝胶电泳-MALDI-TOF-MS质谱技术检测HD组织差异蛋白质所获得的GSTP1蛋白可为寻找HD早期诊断的分子标记物提供理论依据;GSTP1基因异常甲基化、表达与HD的发生发展相关.
目的 利用雙嚮凝膠電泳-基質輔助激光解吸離子化飛行時間質譜(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)技術進行先天性巨結腸癥(hirschsprung disease,HD)中蛋白質錶達譜的研究;尋找HD中的生物標誌物,為臨床HD的早期無創性診斷提供依據.方法 分彆提取20例HD患者配對狹窄段及正常段腸管組織的總蛋白質,進行雙嚮凝膠電泳、銀染,兩組凝膠圖像差異分析,得到差異蛋白質.對目的穀胱苷肽-S-轉移酶1(glutathione S-transferase pi,GSTP1)蛋白質進行MALDI-TOF-MS質譜分析.運用甲基化特異性聚閤酶鏈反應方法檢測HD中GSTP1基因啟動子區5′耑 CpG 島甲基化程度與錶達.採用熒光實時定量PCR方法檢測HD中GSTP1基因的mRNA 轉錄水平.結果 穫得瞭分辨率較高的HD狹窄段及正常段腸管組織雙嚮凝膠電泳圖譜;得到暘性結果的差異蛋白質穀胱甘肽-S-轉移酶(glutathione S-transferase,GST).MSP 檢測48 例HD,其中狹窄段腸管組織GSTP1基因高甲基化41例;而正常段腸管組織GSTP1基因甲基化僅7例.HD狹窄段腸管組織GSTP1基因mRNA錶達低于正常段腸管組織(P<0.05).結論 利用雙嚮凝膠電泳-MALDI-TOF-MS質譜技術檢測HD組織差異蛋白質所穫得的GSTP1蛋白可為尋找HD早期診斷的分子標記物提供理論依據;GSTP1基因異常甲基化、錶達與HD的髮生髮展相關.
목적 이용쌍향응효전영-기질보조격광해흡리자화비행시간질보(matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)기술진행선천성거결장증(hirschsprung disease,HD)중단백질표체보적연구;심조HD중적생물표지물,위림상HD적조기무창성진단제공의거.방법 분별제취20례HD환자배대협착단급정상단장관조직적총단백질,진행쌍향응효전영、은염,량조응효도상차이분석,득도차이단백질.대목적곡광감태-S-전이매1(glutathione S-transferase pi,GSTP1)단백질진행MALDI-TOF-MS질보분석.운용갑기화특이성취합매련반응방법검측HD중GSTP1기인계동자구5′단 CpG 도갑기화정도여표체.채용형광실시정량PCR방법검측HD중GSTP1기인적mRNA 전록수평.결과 획득료분변솔교고적HD협착단급정상단장관조직쌍향응효전영도보;득도양성결과적차이단백질곡광감태-S-전이매(glutathione S-transferase,GST).MSP 검측48 례HD,기중협착단장관조직GSTP1기인고갑기화41례;이정상단장관조직GSTP1기인갑기화부7례.HD협착단장관조직GSTP1기인mRNA표체저우정상단장관조직(P<0.05).결론 이용쌍향응효전영-MALDI-TOF-MS질보기술검측HD조직차이단백질소획득적GSTP1단백가위심조HD조기진단적분자표기물제공이론의거;GSTP1기인이상갑기화、표체여HD적발생발전상관.
