CAJ | 학술논문

本研究探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对人急性单核细胞白血病细胞株U937的作用.采用磺酰罗丹明B(SRB)法检测EGCG对U937细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测EGCG对U937细胞周期的影响;采用RT-PCR、Westren blot法分别检测p16 mRNA、蛋白的表达;采用nMSP法检测U937细胞p16甲基化状态变化;采用RT-PCR法检测DNA甲基转移酶1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B基因mRNA的表达.结果表明:EGCG可以剂量依赖性和时间依赖性地抑制U937细胞增殖(r=0.71),且呈剂量依赖性诱导G0/G1期细胞阻滞;EGCG可以呈剂量依赖性上调U937细胞p16 mRNA、蛋白的表达;EGCG可以呈剂量依赖性减弱U937细胞p16甲基化程度;EGCG可以剂量依赖性地下调U937细胞DNMq3A、DNMT3B mRNA表达,而对DNMT1 mRNA的表达无影响.结论:EGCG在体外通过抑制DNMT3A、DNMT3B和(或)直接使异常高甲基化的p16启动子CpG岛DNA去甲基化,恢复p16 mRNA水平和蛋白水平的表达,调控U937细胞阻滞于G0/G1期,抑制U937细胞的增长.
본연구탐토표몰식자인다소몰식자산지(EGCG)대인급성단핵세포백혈병세포주U937적작용.채용광선라단명B(SRB)법검측EGCG대U937세포증식적영향;채용류식세포술검측EGCG대U937세포주기적영향;채용RT-PCR、Westren blot법분별검측p16 mRNA、단백적표체;채용nMSP법검측U937세포p16갑기화상태변화;채용RT-PCR법검측DNA갑기전이매1(DNMT1)、DNMT3A、DNMT3B기인mRNA적표체.결과표명:EGCG가이제량의뢰성화시간의뢰성지억제U937세포증식(r=0.71),차정제량의뢰성유도G0/G1기세포조체;EGCG가이정제량의뢰성상조U937세포p16 mRNA、단백적표체;EGCG가이정제량의뢰성감약U937세포p16갑기화정도;EGCG가이제량의뢰성지하조U937세포DNMq3A、DNMT3B mRNA표체,이대DNMT1 mRNA적표체무영향.결론:EGCG재체외통과억제DNMT3A、DNMT3B화(혹)직접사이상고갑기화적p16계동자CpG도DNA거갑기화,회복p16 mRNA수평화단백수평적표체,조공U937세포조체우G0/G1기,억제U937세포적증장.