重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2009年
17期
2184-2186,2188
,共4页
胸腺素β4%人肾小管上皮细胞%肌成纤维细胞%真核表达载体%转分化
胸腺素β4%人腎小管上皮細胞%肌成纖維細胞%真覈錶達載體%轉分化
흉선소β4%인신소관상피세포%기성섬유세포%진핵표체재체%전분화
目的 研究胸腺素β4基因对人肾小管上皮细胞株(HKC)上皮-肌成纤维细胞转分化(EMT)的影响.方法 采用 RT-PCR和 T-A克隆技术,从SW480细胞中扩增胸腺素β4基因全长 cDNA,克隆到T载体中,再亚克隆到 pIRES2-EGFP质粒载体,得到表达胸腺素β4基因的真核表达载体和阴性对照载体,转染HKC,得到胸腺素β4表达增强的HKC-Tβ4和胸腺素β4表达未受影响的HKC-EGFP.分别采用RT-PCR和Western blot检测HKC、HKC-Tβ4和HKC-EGFP 3组细胞胸腺素β4、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素表达.结果 与HKC组及HKC-EGFP组相比,HKC-Tβ4组胸腺素β4和α-SMA表达显著增高,E-钙黏素表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.01).结论 胸腺素β4基因转染能诱导HKC发生EMT,提示胸腺素β4是诱导EMT的重要分子,可能成为肾纤维化治疗的靶目标.
目的 研究胸腺素β4基因對人腎小管上皮細胞株(HKC)上皮-肌成纖維細胞轉分化(EMT)的影響.方法 採用 RT-PCR和 T-A剋隆技術,從SW480細胞中擴增胸腺素β4基因全長 cDNA,剋隆到T載體中,再亞剋隆到 pIRES2-EGFP質粒載體,得到錶達胸腺素β4基因的真覈錶達載體和陰性對照載體,轉染HKC,得到胸腺素β4錶達增彊的HKC-Tβ4和胸腺素β4錶達未受影響的HKC-EGFP.分彆採用RT-PCR和Western blot檢測HKC、HKC-Tβ4和HKC-EGFP 3組細胞胸腺素β4、α-平滑肌肌動蛋白(α-SMA)和E-鈣黏素錶達.結果 與HKC組及HKC-EGFP組相比,HKC-Tβ4組胸腺素β4和α-SMA錶達顯著增高,E-鈣黏素錶達顯著降低,差異有統計學意義(P<0.01).結論 胸腺素β4基因轉染能誘導HKC髮生EMT,提示胸腺素β4是誘導EMT的重要分子,可能成為腎纖維化治療的靶目標.
목적 연구흉선소β4기인대인신소관상피세포주(HKC)상피-기성섬유세포전분화(EMT)적영향.방법 채용 RT-PCR화 T-A극륭기술,종SW480세포중확증흉선소β4기인전장 cDNA,극륭도T재체중,재아극륭도 pIRES2-EGFP질립재체,득도표체흉선소β4기인적진핵표체재체화음성대조재체,전염HKC,득도흉선소β4표체증강적HKC-Tβ4화흉선소β4표체미수영향적HKC-EGFP.분별채용RT-PCR화Western blot검측HKC、HKC-Tβ4화HKC-EGFP 3조세포흉선소β4、α-평활기기동단백(α-SMA)화E-개점소표체.결과 여HKC조급HKC-EGFP조상비,HKC-Tβ4조흉선소β4화α-SMA표체현저증고,E-개점소표체현저강저,차이유통계학의의(P<0.01).결론 흉선소β4기인전염능유도HKC발생EMT,제시흉선소β4시유도EMT적중요분자,가능성위신섬유화치료적파목표.
