中国生物制品学杂志
中國生物製品學雜誌
중국생물제품학잡지
CHINESE JOURNAL OF BIOLOGICALS
2008年
11期
988-991
,共4页
张晴妮%徐骥%芮康宁%罗鹏%杨子义
張晴妮%徐驥%芮康寧%囉鵬%楊子義
장청니%서기%예강저%라붕%양자의
干扰素-τ%突变型%毕赤酵母%抗病毒作用%乙型肝炎病毒
榦擾素-τ%突變型%畢赤酵母%抗病毒作用%乙型肝炎病毒
간우소-τ%돌변형%필적효모%항병독작용%을형간염병독
目的 在毕赤酵母中表达突变型干扰素-τ(TFN-τ),并检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用.方法 将绵羊IFN-τ序列中6个氨基酸突变为人IFN-α相应的氨基酸,将合成的基因克隆至pPICZa质粒.构建突变型IFN-τ表达质粒pPICZα-IFN-τ,转化巴斯德毕赤酵母中进行高密度发酵.发酵上清液经超滤浓缩、离子交换层析和分子筛层析纯化后,检测其生物学活性及抗乙型肝炎病毒作用,并与市售IFN-α2a进行比较.结果 发酵上清液中突变型IFN-τ的表达量为400～500 mg/L,占上清总蛋白的40%以上;纯化收率达31.4%,纯度约为95%;比活为2.1×107 IU/mg;对乙型肝炎病毒的抑制作用与IFN-α2a相当,但细胞毒性显著低于后者.结论 已在毕赤酵母中高效表达了突变型IFN-τ,表达的蛋白具有较高的生物学活性,对乙型肝炎病毒有良好的抑制作用,且细胞毒性较低.
目的 在畢赤酵母中錶達突變型榦擾素-τ(TFN-τ),併檢測其生物學活性及抗乙型肝炎病毒作用.方法 將綿羊IFN-τ序列中6箇氨基痠突變為人IFN-α相應的氨基痠,將閤成的基因剋隆至pPICZa質粒.構建突變型IFN-τ錶達質粒pPICZα-IFN-τ,轉化巴斯德畢赤酵母中進行高密度髮酵.髮酵上清液經超濾濃縮、離子交換層析和分子篩層析純化後,檢測其生物學活性及抗乙型肝炎病毒作用,併與市售IFN-α2a進行比較.結果 髮酵上清液中突變型IFN-τ的錶達量為400～500 mg/L,佔上清總蛋白的40%以上;純化收率達31.4%,純度約為95%;比活為2.1×107 IU/mg;對乙型肝炎病毒的抑製作用與IFN-α2a相噹,但細胞毒性顯著低于後者.結論 已在畢赤酵母中高效錶達瞭突變型IFN-τ,錶達的蛋白具有較高的生物學活性,對乙型肝炎病毒有良好的抑製作用,且細胞毒性較低.
목적 재필적효모중표체돌변형간우소-τ(TFN-τ),병검측기생물학활성급항을형간염병독작용.방법 장면양IFN-τ서렬중6개안기산돌변위인IFN-α상응적안기산,장합성적기인극륭지pPICZa질립.구건돌변형IFN-τ표체질립pPICZα-IFN-τ,전화파사덕필적효모중진행고밀도발효.발효상청액경초려농축、리자교환층석화분자사층석순화후,검측기생물학활성급항을형간염병독작용,병여시수IFN-α2a진행비교.결과 발효상청액중돌변형IFN-τ적표체량위400～500 mg/L,점상청총단백적40%이상;순화수솔체31.4%,순도약위95%;비활위2.1×107 IU/mg;대을형간염병독적억제작용여IFN-α2a상당,단세포독성현저저우후자.결론 이재필적효모중고효표체료돌변형IFN-τ,표체적단백구유교고적생물학활성,대을형간염병독유량호적억제작용,차세포독성교저.
