CAJ | 학술논문

目的:探讨分离骨髓间充质干细胞(MSCs)并诱导其向软骨细胞转化的体外培养方法,为软骨组织工程的种子细胞来源提供实验依据.方法:抽取兔髂骨骨髓液,经梯度离心法和贴壁法进行体外培养,贴壁细胞传代,取第3代细胞在培养基中添加软骨分化诱导剂[转化生长因子(TGF-β2)10ng/ml、地塞米松10-7mol/L、维生素C 50μmol/L],经7、14、21 d诱导培养后,倒置显微镜观察细胞形态,免疫组织化学染色检测软骨特异性Ⅱ型胶原表达.将诱导细胞与软骨支架材料--聚磷酸钙纤维/左旋聚乳酸(CPP/PLLA)复合,1周后终止培养,扫描电镜观察细胞黏附情况.结果:诱导后细胞体外扩增能力显著降低,细胞形态由成纤维样梭形向多角形、多边形或类圆形转变,诱导21 d后细胞形态变化最为显著,Ⅱ型胶原免疫组化染色深而均匀.诱导后的MSCs可在支架材料内良好黏附生长.结论:体外培养的MSCs可定向诱导分化为软骨细胞,分泌软骨细胞特异性基质,可用作软骨组织工程的种子细胞.
목적:탐토분리골수간충질간세포(MSCs)병유도기향연골세포전화적체외배양방법,위연골조직공정적충자세포래원제공실험의거.방법:추취토가골골수액,경제도리심법화첩벽법진행체외배양,첩벽세포전대,취제3대세포재배양기중첨가연골분화유도제[전화생장인자(TGF-β2)10ng/ml、지새미송10-7mol/L、유생소C 50μmol/L],경7、14、21 d유도배양후,도치현미경관찰세포형태,면역조직화학염색검측연골특이성Ⅱ형효원표체.장유도세포여연골지가재료--취린산개섬유/좌선취유산(CPP/PLLA)복합,1주후종지배양,소묘전경관찰세포점부정황.결과:유도후세포체외확증능력현저강저,세포형태유성섬유양사형향다각형、다변형혹류원형전변,유도21 d후세포형태변화최위현저,Ⅱ형효원면역조화염색심이균균.유도후적MSCs가재지가재료내량호점부생장.결론:체외배양적MSCs가정향유도분화위연골세포,분비연골세포특이성기질,가용작연골조직공정적충자세포.