中山大学学报（医学科学版）
中山大學學報（醫學科學版）
중산대학학보（의학과학판）
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2008年
3期
252-257
,共6页
张海燕%姜宗培%常洁%李晓艳%朱恒梅%余学清
張海燕%薑宗培%常潔%李曉豔%硃恆梅%餘學清
장해연%강종배%상길%리효염%주항매%여학청
转化生长因子β1%NAD(P)H氧化酶%活性氧%单核细胞趋化蛋白-1%白细胞介素-6
轉化生長因子β1%NAD(P)H氧化酶%活性氧%單覈細胞趨化蛋白-1%白細胞介素-6
전화생장인자β1%NAD(P)H양화매%활성양%단핵세포추화단백-1%백세포개소-6
[目的]观察转化生长因子β1(TGF-β1)对大鼠肾小管上皮细胞单核细胞趋化因子-1(MCP-1)及白细胞介素6(IL-6)表达的影响,并探讨NADPH氧化酶在其中的作用.[方法]以大鼠.肾小管上皮细胞株(NRK-52E)为研究对象,采用TGF-β1(10 ng/mL)刺激0 h,2 h,4 h,8 h,12 h,24 h分别收取RNA;刺激0 h,12 h,24h,48 h,72 h分别收取细胞上清液;部分实验中培养的细胞在刺激前用NADPH氧化酶抑制剂DPI(0.1,1,5,10μmol/L)预处理1 h,然后含10 ng的TGF-β1无血清DMEM/F12培养液分别培养12 h(收集RNA)和24 h(收集细胞上清液).所有实验重复3次.细胞内活性氧(ROS)的产生采用激光共聚焦显微镜观察.NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亚单位以及MCP-1和IL-6 mRNA的表达采用RT-PCR检测.细胞上清液中MCP-1的含量采用ELISA检测.[结果]TGF-β1可显著上调NADPH氧化酶p67phox亚单位mRNA的表达,8 h为对照的2.43倍(P<0.01),24 h达3.59倍(P<0.01).但对p22phox、gp91phox和p47phox亚单位mRNA表达无显著影响.TGF-β1可显著增加细胞内ROS产生,DPI预处理后ROS产生较TGF-β1刺激组降低了43.69%(P<0.05).TGF-β1可显著上调MCP-1和IL-6 mRNA及蛋白的表达.DPI预处理可明显逆转TGF-β1诱导的MCP-1和IL-6的上调表达.[结论]TGF-β1可促使细胞ROS产生增加.TGF-β1可能通过NADPH氧化酶依赖的ROS介导了大鼠肾小管上皮细胞MCP-1及IL-6的上调表达.
[目的]觀察轉化生長因子β1(TGF-β1)對大鼠腎小管上皮細胞單覈細胞趨化因子-1(MCP-1)及白細胞介素6(IL-6)錶達的影響,併探討NADPH氧化酶在其中的作用.[方法]以大鼠.腎小管上皮細胞株(NRK-52E)為研究對象,採用TGF-β1(10 ng/mL)刺激0 h,2 h,4 h,8 h,12 h,24 h分彆收取RNA;刺激0 h,12 h,24h,48 h,72 h分彆收取細胞上清液;部分實驗中培養的細胞在刺激前用NADPH氧化酶抑製劑DPI(0.1,1,5,10μmol/L)預處理1 h,然後含10 ng的TGF-β1無血清DMEM/F12培養液分彆培養12 h(收集RNA)和24 h(收集細胞上清液).所有實驗重複3次.細胞內活性氧(ROS)的產生採用激光共聚焦顯微鏡觀察.NADPH氧化酶p22phox、gp91phox、p47phox和p67phox亞單位以及MCP-1和IL-6 mRNA的錶達採用RT-PCR檢測.細胞上清液中MCP-1的含量採用ELISA檢測.[結果]TGF-β1可顯著上調NADPH氧化酶p67phox亞單位mRNA的錶達,8 h為對照的2.43倍(P<0.01),24 h達3.59倍(P<0.01).但對p22phox、gp91phox和p47phox亞單位mRNA錶達無顯著影響.TGF-β1可顯著增加細胞內ROS產生,DPI預處理後ROS產生較TGF-β1刺激組降低瞭43.69%(P<0.05).TGF-β1可顯著上調MCP-1和IL-6 mRNA及蛋白的錶達.DPI預處理可明顯逆轉TGF-β1誘導的MCP-1和IL-6的上調錶達.[結論]TGF-β1可促使細胞ROS產生增加.TGF-β1可能通過NADPH氧化酶依賴的ROS介導瞭大鼠腎小管上皮細胞MCP-1及IL-6的上調錶達.
[목적]관찰전화생장인자β1(TGF-β1)대대서신소관상피세포단핵세포추화인자-1(MCP-1)급백세포개소6(IL-6)표체적영향,병탐토NADPH양화매재기중적작용.[방법]이대서.신소관상피세포주(NRK-52E)위연구대상,채용TGF-β1(10 ng/mL)자격0 h,2 h,4 h,8 h,12 h,24 h분별수취RNA;자격0 h,12 h,24h,48 h,72 h분별수취세포상청액;부분실험중배양적세포재자격전용NADPH양화매억제제DPI(0.1,1,5,10μmol/L)예처리1 h,연후함10 ng적TGF-β1무혈청DMEM/F12배양액분별배양12 h(수집RNA)화24 h(수집세포상청액).소유실험중복3차.세포내활성양(ROS)적산생채용격광공취초현미경관찰.NADPH양화매p22phox、gp91phox、p47phox화p67phox아단위이급MCP-1화IL-6 mRNA적표체채용RT-PCR검측.세포상청액중MCP-1적함량채용ELISA검측.[결과]TGF-β1가현저상조NADPH양화매p67phox아단위mRNA적표체,8 h위대조적2.43배(P<0.01),24 h체3.59배(P<0.01).단대p22phox、gp91phox화p47phox아단위mRNA표체무현저영향.TGF-β1가현저증가세포내ROS산생,DPI예처리후ROS산생교TGF-β1자격조강저료43.69%(P<0.05).TGF-β1가현저상조MCP-1화IL-6 mRNA급단백적표체.DPI예처리가명현역전TGF-β1유도적MCP-1화IL-6적상조표체.[결론]TGF-β1가촉사세포ROS산생증가.TGF-β1가능통과NADPH양화매의뢰적ROS개도료대서신소관상피세포MCP-1급IL-6적상조표체.
