CAJ | 학술논문

目的:关于鼠、兔等小动物骨髓间充质干细胞的研究较多,而对大动物骨髓间充质干细胞研究较少.实验拟了解体外培养的羊骨髓间充质干细胞的生物学特性,以便于组织工程研究使用.方法:实验于2006-01/2007-01在天津市天津医院完成.①实验材料:天津医院动物实验中心提供的健康中国山羊,10月龄,实验过程中对动物处置符合动物伦理学标准.②实验方法:抽取羊骨髓5 mL,梯度离心制备单个有核细胞,并接种于无菌的50 mL塑料培养瓶中,培养体系为含体积分数为0.10 FBS的DMEM.利用多孔培养板对培养的骨髓间充质干细胞进行细胞生长曲线测定.选用抗CD44单克隆抗体,应用免疫组化学方法对培养的骨髓间充质干细胞进行表型鉴定.结果:①培养的骨髓间充质干细胞黏附贴壁、呈纺锤状,并有多个突起.②一般细胞接种密度下的骨髓间充质干细胞,三代细胞生长周期基本一致,均为接种培养后前二三天,生长较缓慢,为生长迟滞期.3 d后细胞生长加速,有一快速增长过程,达到对数生长期,于七八天时,细胞数达最高值,为生长平台期,其后生长速度减缓.③免疫细胞化学染色后显示所培养细胞的细胞膜抗原CD44有阳性表达.结论:培养的骨髓间充质干细胞具有较强的遗传稳定性和增殖能力,培养的细胞不是骨髓造血干/祖细胞,而是一群均一的间充质干细胞,具有独特的增殖和表型特征.
목적:관우서、토등소동물골수간충질간세포적연구교다,이대대동물골수간충질간세포연구교소.실험의료해체외배양적양골수간충질간세포적생물학특성,이편우조직공정연구사용.방법:실험우2006-01/2007-01재천진시천진의원완성.①실험재료:천진의원동물실험중심제공적건강중국산양,10월령,실험과정중대동물처치부합동물윤리학표준.②실험방법:추취양골수5 mL,제도리심제비단개유핵세포,병접충우무균적50 mL소료배양병중,배양체계위함체적분수위0.10 FBS적DMEM.이용다공배양판대배양적골수간충질간세포진행세포생장곡선측정.선용항CD44단극륭항체,응용면역조화학방법대배양적골수간충질간세포진행표형감정.결과:①배양적골수간충질간세포점부첩벽、정방추상,병유다개돌기.②일반세포접충밀도하적골수간충질간세포,삼대세포생장주기기본일치,균위접충배양후전이삼천,생장교완만,위생장지체기.3 d후세포생장가속,유일쾌속증장과정,체도대수생장기,우칠팔천시,세포수체최고치,위생장평태기,기후생장속도감완.③면역세포화학염색후현시소배양세포적세포막항원CD44유양성표체.결론:배양적골수간충질간세포구유교강적유전은정성화증식능력,배양적세포불시골수조혈간/조세포,이시일군균일적간충질간세포,구유독특적증식화표형특정.