CAJ | 학술논문

[目的]简化胰岛的分离纯化方法,建立完善的胰岛评价体系.[方法]采用Ⅴ型胶原酶分离出Sprague-Dawley大鼠胰岛,并采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法纯化胰岛.纯化的胰岛通过双硫腙(Dithizone,DTZ)染色进行计数及纯度检测,丫啶橙(AO)-碘化丙啶(PI)双染色法确定分离细胞的存活率,体外葡萄糖刺激释放胰岛素试验检测胰岛的分泌活性.采用Adobe Photoshop程序改进了常规的胰岛计数方法,并进行胰岛标准计数.[结果]平均每只成年Sprague Dawley大鼠的胰腺,可获得(3 840±24)当量数(IEQ)纯化胰岛,纯度可达到90%,细胞平均存活率达92%.[结论]采用改良的3层Dextran不连续密度梯度离心法及基于Adobe Photoshop程序的标准计数方法,可分别用于大鼠胰岛分离纯化和计数.
[목적]간화이도적분리순화방법,건립완선적이도평개체계.[방법]채용Ⅴ형효원매분리출Sprague-Dawley대서이도,병채용개량적3층Dextran불련속밀도제도리심법순화이도.순화적이도통과쌍류종(Dithizone,DTZ)염색진행계수급순도검측,아정등(AO)-전화병정(PI)쌍염색법학정분리세포적존활솔,체외포도당자격석방이도소시험검측이도적분비활성.채용Adobe Photoshop정서개진료상규적이도계수방법,병진행이도표준계수.[결과]평균매지성년Sprague Dawley대서적이선,가획득(3 840±24)당량수(IEQ)순화이도,순도가체도90%,세포평균존활솔체92%.[결론]채용개량적3층Dextran불련속밀도제도리심법급기우Adobe Photoshop정서적표준계수방법,가분별용우대서이도분리순화화계수.