犬细小病毒VP2基因的克隆及其在毕赤酵母中的表达
견세소병독VP2기인적극륭급기재필적효모중적표체
Cloning of VP2 Gene of Canine Parvovirus and Expression in Pichia pastoris
  • 万方数据
    中国比较医学杂志 중국비교의학잡지
    CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
    2007年 12期 693-696,701 ,共5页

    张云霞%丁银巧%赵铁柱%杨璐%孙明%曹振%王传彬%陈西钊%田克恭

    장운하%정은교%조철주%양로%손명%조진%왕전빈%진서쇠%전극공

    犬细小病毒VP2基因%毕赤酵母%真核表达 犬細小病毒VP2基因%畢赤酵母%真覈錶達
    견세소병독VP2기인%필적효모%진핵표체
    目的 表达犬细小病毒VP2蛋白(CPV VP2),用于犬细小病毒病的诊断、疫苗研制和VP2蛋白功能研究.方法 采用PCR方法对CPV VP2基因进行扩增,将CPV VP2基因克隆到毕赤酵母(Pichia pastoris)分泌表达载体pPICZαA中,构建真核重组表达载体pPICZαA-VP2,将该重组质粒线性化后,转化毕赤酵母菌GS115中,在甲醇诱导下表达CPV VP2,SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达蛋白.结果 成功扩增了CPV VP2基因,构建了真核重组表达载体pPICZαA-VP2在毕赤酵母菌中表达出约64.35kD蛋白.Western blotting鉴定表明,表达VP2蛋白与犬细小病毒阳性血清有反应性.结论 在毕赤酵母中成功地表达了CPV VP2蛋白,能被犬细小病毒阳性血清识别.
    목적 표체견세소병독VP2단백(CPV VP2),용우견세소병독병적진단、역묘연제화VP2단백공능연구.방법 채용PCR방법대CPV VP2기인진행확증,장CPV VP2기인극륭도필적효모(Pichia pastoris)분비표체재체pPICZαA중,구건진핵중조표체재체pPICZαA-VP2,장해중조질립선성화후,전화필적효모균GS115중,재갑순유도하표체CPV VP2,SDS-PAGE화Western blotting감정표체단백.결과 성공확증료CPV VP2기인,구건료진핵중조표체재체pPICZαA-VP2재필적효모균중표체출약64.35kD단백.Western blotting감정표명,표체VP2단백여견세소병독양성혈청유반응성.결론 재필적효모중성공지표체료CPV VP2단백,능피견세소병독양성혈청식별.
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