中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2007年
11期
1127-1130
,共4页
张海珠%袁保梅%宋晓荣%石佑恩
張海珠%袁保梅%宋曉榮%石祐恩
장해주%원보매%송효영%석우은
弓形虫%虫株%抑制性消减杂交
弓形蟲%蟲株%抑製性消減雜交
궁형충%충주%억제성소감잡교
目的 构建不同毒力株弓形虫速殖子cDNA消减文库.方法 以弓形虫强毒株RH株速殖子为Tester、弱毒株Prugniaud株速殖子为Driver,进行正向抑制性消减杂交;以Prugniaud株为Tester、RH株为Driver,进行反向抑制性消减杂交.分别将获取的2组抑制性消减杂交产物与pGEM-T载体连接,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆并以PCR扩增鉴定插入片段.结果 获得正向和反向cDNA消减文库,每个消减文库分别随机挑取384个阳性克隆,PCR扩增显示插入率为98%,片段长度在200～2 000 bp之间.结论 通过抑制性消减杂交技术成功构建2个消减文库,为进一步筛选和鉴定弓形虫毒力相关基因奠定了基础.
目的 構建不同毒力株弓形蟲速殖子cDNA消減文庫.方法 以弓形蟲彊毒株RH株速殖子為Tester、弱毒株Prugniaud株速殖子為Driver,進行正嚮抑製性消減雜交;以Prugniaud株為Tester、RH株為Driver,進行反嚮抑製性消減雜交.分彆將穫取的2組抑製性消減雜交產物與pGEM-T載體連接,轉化大腸桿菌DH5α,篩選暘性剋隆併以PCR擴增鑒定插入片段.結果 穫得正嚮和反嚮cDNA消減文庫,每箇消減文庫分彆隨機挑取384箇暘性剋隆,PCR擴增顯示插入率為98%,片段長度在200～2 000 bp之間.結論 通過抑製性消減雜交技術成功構建2箇消減文庫,為進一步篩選和鑒定弓形蟲毒力相關基因奠定瞭基礎.
목적 구건불동독력주궁형충속식자cDNA소감문고.방법 이궁형충강독주RH주속식자위Tester、약독주Prugniaud주속식자위Driver,진행정향억제성소감잡교;이Prugniaud주위Tester、RH주위Driver,진행반향억제성소감잡교.분별장획취적2조억제성소감잡교산물여pGEM-T재체련접,전화대장간균DH5α,사선양성극륭병이PCR확증감정삽입편단.결과 획득정향화반향cDNA소감문고,매개소감문고분별수궤도취384개양성극륭,PCR확증현시삽입솔위98%,편단장도재200～2 000 bp지간.결론 통과억제성소감잡교기술성공구건2개소감문고,위진일보사선화감정궁형충독력상관기인전정료기출.
