河北师范大学学报（自然科学版）
河北師範大學學報（自然科學版）
하북사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2007年
6期
806-809
,共4页
郭伟云%汤祥忠%姚朝阳%邵强%李宗义
郭偉雲%湯祥忠%姚朝暘%邵彊%李宗義
곽위운%탕상충%요조양%소강%리종의
云芝%漆酶%纯化%酶学特性
雲芝%漆酶%純化%酶學特性
운지%칠매%순화%매학특성
采用DEAE-Sephrose Fast Flow和Sephadex G-100两步柱层析,得到2种漆酶同工酶,分别命名为LccA和LccB.以ABTS为底物在适当条件下与酶带反应呈绿色谱带鉴定出漆酶谱带.LccA的纯化倍数和回收率分别为53.88和7%,LccB的纯化倍数和回收率分别为208.21和29%.用SDS-PAGE测定两漆酶的分子量分别为64.2 ku和60.7 ku;LccA和LccB的最适作用温度分别是40℃和50℃;最适反应pH值为3.5和4.0;其N-末端部分氨基酸序列为AIGPK和GIGPV,与其他真菌漆酶相比显示很高的同源性,以ABTS为底物的Km值分别为68.96μmol/L和76.92μmol/L.Cu2+对两同工酶都有明显的激活作用,Fe2+,Ag+完全抑制两同工酶的活性.
採用DEAE-Sephrose Fast Flow和Sephadex G-100兩步柱層析,得到2種漆酶同工酶,分彆命名為LccA和LccB.以ABTS為底物在適噹條件下與酶帶反應呈綠色譜帶鑒定齣漆酶譜帶.LccA的純化倍數和迴收率分彆為53.88和7%,LccB的純化倍數和迴收率分彆為208.21和29%.用SDS-PAGE測定兩漆酶的分子量分彆為64.2 ku和60.7 ku;LccA和LccB的最適作用溫度分彆是40℃和50℃;最適反應pH值為3.5和4.0;其N-末耑部分氨基痠序列為AIGPK和GIGPV,與其他真菌漆酶相比顯示很高的同源性,以ABTS為底物的Km值分彆為68.96μmol/L和76.92μmol/L.Cu2+對兩同工酶都有明顯的激活作用,Fe2+,Ag+完全抑製兩同工酶的活性.
채용DEAE-Sephrose Fast Flow화Sephadex G-100량보주층석,득도2충칠매동공매,분별명명위LccA화LccB.이ABTS위저물재괄당조건하여매대반응정록색보대감정출칠매보대.LccA적순화배수화회수솔분별위53.88화7%,LccB적순화배수화회수솔분별위208.21화29%.용SDS-PAGE측정량칠매적분자량분별위64.2 ku화60.7 ku;LccA화LccB적최괄작용온도분별시40℃화50℃;최괄반응pH치위3.5화4.0;기N-말단부분안기산서렬위AIGPK화GIGPV,여기타진균칠매상비현시흔고적동원성,이ABTS위저물적Km치분별위68.96μmol/L화76.92μmol/L.Cu2+대량동공매도유명현적격활작용,Fe2+,Ag+완전억제량동공매적활성.
