中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2007年
10期
44-47
,共4页
吴静%杨利敏%施振声%黄立纲%刘文军
吳靜%楊利敏%施振聲%黃立綱%劉文軍
오정%양리민%시진성%황립강%류문군
ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶%fat1%人胚肾细胞
ω-3多聚不飽和脂肪痠脫氫酶%fat1%人胚腎細胞
ω-3다취불포화지방산탈경매%fat1%인배신세포
目的:构建ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶真核表达载体,并在293T细胞(人胚肾细胞)中实现表达.方法:通过RT-PCR法扩增得到ω-3多聚不饱和脂肪酸脱氢酶基因fat1,构建重组真核表达载体pCMV-Myc-fa1,用脂质体法转染293T细胞,Western b10t检测fat1的表达,并用间接免疫荧光(IFA)确定其在293T细胞中的定位情况.结果:构建真核表达质粒pCMV-Myc-fat1,转染293T细胞后,可检测到细胞内有fat1的表达并确定其在细胞中的位置.结论:成功构建真核表达质粒pCMV-Myc-fat1,可检测出细胞内有fat1的表达并确定其在细胞膜和细胞质内均有表达,为进行fat1的功能研究奠定了基础.
目的:構建ω-3多聚不飽和脂肪痠脫氫酶真覈錶達載體,併在293T細胞(人胚腎細胞)中實現錶達.方法:通過RT-PCR法擴增得到ω-3多聚不飽和脂肪痠脫氫酶基因fat1,構建重組真覈錶達載體pCMV-Myc-fa1,用脂質體法轉染293T細胞,Western b10t檢測fat1的錶達,併用間接免疫熒光(IFA)確定其在293T細胞中的定位情況.結果:構建真覈錶達質粒pCMV-Myc-fat1,轉染293T細胞後,可檢測到細胞內有fat1的錶達併確定其在細胞中的位置.結論:成功構建真覈錶達質粒pCMV-Myc-fat1,可檢測齣細胞內有fat1的錶達併確定其在細胞膜和細胞質內均有錶達,為進行fat1的功能研究奠定瞭基礎.
목적:구건ω-3다취불포화지방산탈경매진핵표체재체,병재293T세포(인배신세포)중실현표체.방법:통과RT-PCR법확증득도ω-3다취불포화지방산탈경매기인fat1,구건중조진핵표체재체pCMV-Myc-fa1,용지질체법전염293T세포,Western b10t검측fat1적표체,병용간접면역형광(IFA)학정기재293T세포중적정위정황.결과:구건진핵표체질립pCMV-Myc-fat1,전염293T세포후,가검측도세포내유fat1적표체병학정기재세포중적위치.결론:성공구건진핵표체질립pCMV-Myc-fat1,가검측출세포내유fat1적표체병학정기재세포막화세포질내균유표체,위진행fat1적공능연구전정료기출.
