CAJ | 학술논문

目的:观察应用假膜成纤维细胞在裸鼠颅骨上构建人工关节周围骨溶解体内模型的可行性.方法:实验于2006-05/2007-04在上海市第六人民医院中心实验室和动物实验室完成.①实验材料:取8周龄裸鼠15只,随机数字表法分为假膜成纤维细胞组、关节囊成纤维细胞组、假手术组,5只/组.假膜、关节囊组织分别从人工关节无菌性松动翻修术及初次人工关节置换术中取得,患者均签署知情同意书.②实验方法:在全髋翻修术中取出假体周围的假膜以及初次全髋置换时的关节囊组织,各自分离出成纤维细胞,于每毫升细胞悬液中加入50 μg骨水泥颗粒,刺激24 h后加入巨噬细胞集落刺激因子.假膜成纤维细胞组、关节囊成纤维细胞组建立骨溶解模型,麻醉后切开头皮暴露颅中缝,分别注入经骨水泥颗粒刺激的对应细胞悬液100μL.假手术组仅注入等量含有巨噬细胞集落刺激因子的细胞培养基.③实验评估:各组裸鼠14 d后处死,完整取出颅盖骨,应用乙二胺四乙酸脱钙1个月,制作切片行苏木精-伊红染色,观察颅中缝的骨溶解情况.同时应用IPP图像软件定量分析骨溶解区域的面积,以判断骨吸收情况.结果:15只裸鼠均进入结果分析.①假膜成纤维细胞的表型特点:假膜来源的细胞贴壁生长一段时间后,表现为形态各异的单个核细胞,三四次传代后几乎所有的细胞均呈纺锤状,脯氨酰-4-羟化酶染色呈阳性.②裸鼠颅盖骨的骨溶解情况:与关节囊成纤维细胞组和假手术组相比,假膜成纤维细胞组表现出明显的骨吸收,其骨溶解面积明显升高(P＜0.05).结论:从假膜中分离成纤维细胞可操作性强,假膜成纤维细胞植入裸鼠后能够成功诱导骨溶解形成,可作为分析人工关节周围骨溶解的动物模型.
목적:관찰응용가막성섬유세포재라서로골상구건인공관절주위골용해체내모형적가행성.방법:실험우2006-05/2007-04재상해시제륙인민의원중심실험실화동물실험실완성.①실험재료:취8주령라서15지,수궤수자표법분위가막성섬유세포조、관절낭성섬유세포조、가수술조,5지/조.가막、관절낭조직분별종인공관절무균성송동번수술급초차인공관절치환술중취득,환자균첨서지정동의서.②실험방법:재전관번수술중취출가체주위적가막이급초차전관치환시적관절낭조직,각자분리출성섬유세포,우매호승세포현액중가입50 μg골수니과립,자격24 h후가입거서세포집락자격인자.가막성섬유세포조、관절낭성섬유세포조건립골용해모형,마취후절개두피폭로로중봉,분별주입경골수니과립자격적대응세포현액100μL.가수술조부주입등량함유거서세포집락자격인자적세포배양기.③실험평고:각조라서14 d후처사,완정취출로개골,응용을이알사을산탈개1개월,제작절편행소목정-이홍염색,관찰로중봉적골용해정황.동시응용IPP도상연건정량분석골용해구역적면적,이판단골흡수정황.결과:15지라서균진입결과분석.①가막성섬유세포적표형특점:가막래원적세포첩벽생장일단시간후,표현위형태각이적단개핵세포,삼사차전대후궤호소유적세포균정방추상,포안선-4-간화매염색정양성.②라서로개골적골용해정황:여관절낭성섬유세포조화가수술조상비,가막성섬유세포조표현출명현적골흡수,기골용해면적명현승고(P＜0.05).결론:종가막중분리성섬유세포가조작성강,가막성섬유세포식입라서후능구성공유도골용해형성,가작위분석인공관절주위골용해적동물모형.