沈阳农业大学学报
瀋暘農業大學學報
침양농업대학학보
JOURNAL OF SHENYANG AGRICULTURAL UNIVERSITY
2007年
4期
568-571
,共4页
邱驰%董薇%曹际娟%段玉玺
邱馳%董薇%曹際娟%段玉璽
구치%동미%조제연%단옥새
SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR%转基因油菜%RT73品系%鉴定
SYBR(R) Green Ⅰ實時PCR%轉基因油菜%RT73品繫%鑒定
SYBR(R) Green Ⅰ실시PCR%전기인유채%RT73품계%감정
根据转基因油菜RT73品系转入的外源基因质粒图谱,设计品系鉴定的特异性引物,进行SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR检测,建立转基因油菜品系鉴定的SYBR(R)Green Ⅰ实时PCR方法.同时针对油菜FatA基因设计出内源基因.结果表明:应用实时PCR技术,利用SYBR(R)Green Ⅰ染料能选择性结合双链DNA的特点,可检测到RT73品系特异性靶序列扩增所产生的荧光信号,且通过溶解曲线确定其熔点值为80.2(±0.5).SYBR(R) Green Ⅰ实时PCR能通过溶解曲线有效地区分特异性产物、非特异性产物以及引物二聚体,是鉴定转基因油菜RT73品系的新方法.
根據轉基因油菜RT73品繫轉入的外源基因質粒圖譜,設計品繫鑒定的特異性引物,進行SYBR(R) Green Ⅰ實時PCR檢測,建立轉基因油菜品繫鑒定的SYBR(R)Green Ⅰ實時PCR方法.同時針對油菜FatA基因設計齣內源基因.結果錶明:應用實時PCR技術,利用SYBR(R)Green Ⅰ染料能選擇性結閤雙鏈DNA的特點,可檢測到RT73品繫特異性靶序列擴增所產生的熒光信號,且通過溶解麯線確定其鎔點值為80.2(±0.5).SYBR(R) Green Ⅰ實時PCR能通過溶解麯線有效地區分特異性產物、非特異性產物以及引物二聚體,是鑒定轉基因油菜RT73品繫的新方法.
근거전기인유채RT73품계전입적외원기인질립도보,설계품계감정적특이성인물,진행SYBR(R) Green Ⅰ실시PCR검측,건립전기인유채품계감정적SYBR(R)Green Ⅰ실시PCR방법.동시침대유채FatA기인설계출내원기인.결과표명:응용실시PCR기술,이용SYBR(R)Green Ⅰ염료능선택성결합쌍련DNA적특점,가검측도RT73품계특이성파서렬확증소산생적형광신호,차통과용해곡선학정기용점치위80.2(±0.5).SYBR(R) Green Ⅰ실시PCR능통과용해곡선유효지구분특이성산물、비특이성산물이급인물이취체,시감정전기인유채RT73품계적신방법.
