生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2007年
4期
751-755
,共5页
董武子%沈文正%华进联%窦忠英
董武子%瀋文正%華進聯%竇忠英
동무자%침문정%화진련%두충영
胎牛%雄性生殖干细胞%类胚胎干细胞%多潜能性
胎牛%雄性生殖榦細胞%類胚胎榦細胞%多潛能性
태우%웅성생식간세포%류배태간세포%다잠능성
雄性生殖干细胞(male germ stem cells,mGSCs)来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs),且终生存在于性分化后的睾丸中.从20周胎牛分离睾丸细胞,2步连续贴壁速率差法能有效纯化胎牛mGSCs,经流式细胞仪检测,CD9阳性细胞的比例达到95.8%.原代与支持细胞共培养,出现隆突状和鸟巢状两种细胞集落.获得1株传至4代仍呈现集落生长的细胞株,且集落AKP染色阳性.对第3代鸟巢状细胞集落免疫组化和诱导分化分析,结果显示:SSEA1和Oct-4免疫组化染色阳性;短期内可自发形成c-kit染色阳性的分化态精原细胞;定向诱导分化形成了表达神经丝蛋白(Neuro filament,NF)的神经样细胞和表达α-actin的心肌样细胞团.试验结果表明:20周胎牛雄性生殖干细胞在体外可形成具有多分化潜能性的类胚胎干(embryonic stem,ES)细胞.
雄性生殖榦細胞(male germ stem cells,mGSCs)來源于原始生殖細胞(primordial germ cells,PGCs),且終生存在于性分化後的睪汍中.從20週胎牛分離睪汍細胞,2步連續貼壁速率差法能有效純化胎牛mGSCs,經流式細胞儀檢測,CD9暘性細胞的比例達到95.8%.原代與支持細胞共培養,齣現隆突狀和鳥巢狀兩種細胞集落.穫得1株傳至4代仍呈現集落生長的細胞株,且集落AKP染色暘性.對第3代鳥巢狀細胞集落免疫組化和誘導分化分析,結果顯示:SSEA1和Oct-4免疫組化染色暘性;短期內可自髮形成c-kit染色暘性的分化態精原細胞;定嚮誘導分化形成瞭錶達神經絲蛋白(Neuro filament,NF)的神經樣細胞和錶達α-actin的心肌樣細胞糰.試驗結果錶明:20週胎牛雄性生殖榦細胞在體外可形成具有多分化潛能性的類胚胎榦(embryonic stem,ES)細胞.
웅성생식간세포(male germ stem cells,mGSCs)래원우원시생식세포(primordial germ cells,PGCs),차종생존재우성분화후적고환중.종20주태우분리고환세포,2보련속첩벽속솔차법능유효순화태우mGSCs,경류식세포의검측,CD9양성세포적비례체도95.8%.원대여지지세포공배양,출현륭돌상화조소상량충세포집락.획득1주전지4대잉정현집락생장적세포주,차집락AKP염색양성.대제3대조소상세포집락면역조화화유도분화분석,결과현시:SSEA1화Oct-4면역조화염색양성;단기내가자발형성c-kit염색양성적분화태정원세포;정향유도분화형성료표체신경사단백(Neuro filament,NF)적신경양세포화표체α-actin적심기양세포단.시험결과표명:20주태우웅성생식간세포재체외가형성구유다분화잠능성적류배태간(embryonic stem,ES)세포.
