国际眼科杂志
國際眼科雜誌
국제안과잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF OPHTHALMOLOGY
2007年
2期
326-364
,共39页
熊宇%夏晓波%许惠卓%蒋剑%宋伟涛%刘双珍%许雪亮
熊宇%夏曉波%許惠卓%蔣劍%宋偉濤%劉雙珍%許雪亮
웅우%하효파%허혜탁%장검%송위도%류쌍진%허설량
小干扰RNA%缺氧诱导因子-1α,视网膜新生血管%基因治疗
小榦擾RNA%缺氧誘導因子-1α,視網膜新生血管%基因治療
소간우RNA%결양유도인자-1α,시망막신생혈관%기인치료
目的:探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)特异性小片段干扰性RNA(siRNA)对小鼠视网膜HIF-1α蛋白质的抑制作用.方法:构建HIF-1α siRNA重组质粒pSUPERsiHIF-1α.选择7d龄C57BL/6J小鼠24只,其中6只为正常组(A);另18只建立缺氧诱导的视网膜新生血管模型,并随机分为:对照组(B)、空载体组(C组)和基因治疗组(D组),每组6只.于出舱前1d,向空载体组小鼠玻璃体腔注射pSUPER空载体质粒;基因治疗组注射HIF-1α siRNA重组质粒pSUPERsiHIF-1α.采用FITC-Dextran 荧光造影视网膜铺片观察4组小鼠视网膜血管形态变化;SP免疫组织化学检测各组间HIF-1α的表达差异.结果:荧光造影视网膜铺片显示,A组整个视网膜血管分布呈均匀网状;B、C组视网膜中周部口丁见大片无灌注区,见新生血管丛,伴荧光渗漏;D组无灌注区较B,C组明显减少,周边部毛细血管网基本正常,新生血管丛明显减少.免疫组织化学染色显示,A组HIF-1α蛋白表达刚性;B,C组在神经节细胞层呈阳性表达;D组在神经节细胞层呈弱阳性表达,较B,C组明显减少.结论:采用玻璃体腔注射,通过脂质体介导HIF-1α siRNA重组质粒pSUPERsiHIF-1α 转染视网膜,有效地抑制了缺氧诱导的小鼠视网膜新生血管模型视网膜中HIF-1α 蛋白质的农达及视网膜新生血管的形成.
目的:探討缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)特異性小片段榦擾性RNA(siRNA)對小鼠視網膜HIF-1α蛋白質的抑製作用.方法:構建HIF-1α siRNA重組質粒pSUPERsiHIF-1α.選擇7d齡C57BL/6J小鼠24隻,其中6隻為正常組(A);另18隻建立缺氧誘導的視網膜新生血管模型,併隨機分為:對照組(B)、空載體組(C組)和基因治療組(D組),每組6隻.于齣艙前1d,嚮空載體組小鼠玻璃體腔註射pSUPER空載體質粒;基因治療組註射HIF-1α siRNA重組質粒pSUPERsiHIF-1α.採用FITC-Dextran 熒光造影視網膜鋪片觀察4組小鼠視網膜血管形態變化;SP免疫組織化學檢測各組間HIF-1α的錶達差異.結果:熒光造影視網膜鋪片顯示,A組整箇視網膜血管分佈呈均勻網狀;B、C組視網膜中週部口丁見大片無灌註區,見新生血管叢,伴熒光滲漏;D組無灌註區較B,C組明顯減少,週邊部毛細血管網基本正常,新生血管叢明顯減少.免疫組織化學染色顯示,A組HIF-1α蛋白錶達剛性;B,C組在神經節細胞層呈暘性錶達;D組在神經節細胞層呈弱暘性錶達,較B,C組明顯減少.結論:採用玻璃體腔註射,通過脂質體介導HIF-1α siRNA重組質粒pSUPERsiHIF-1α 轉染視網膜,有效地抑製瞭缺氧誘導的小鼠視網膜新生血管模型視網膜中HIF-1α 蛋白質的農達及視網膜新生血管的形成.
목적:탐토결양유도인자-1α(HIF-1α)특이성소편단간우성RNA(siRNA)대소서시망막HIF-1α단백질적억제작용.방법:구건HIF-1α siRNA중조질립pSUPERsiHIF-1α.선택7d령C57BL/6J소서24지,기중6지위정상조(A);령18지건립결양유도적시망막신생혈관모형,병수궤분위:대조조(B)、공재체조(C조)화기인치료조(D조),매조6지.우출창전1d,향공재체조소서파리체강주사pSUPER공재체질립;기인치료조주사HIF-1α siRNA중조질립pSUPERsiHIF-1α.채용FITC-Dextran 형광조영시망막포편관찰4조소서시망막혈관형태변화;SP면역조직화학검측각조간HIF-1α적표체차이.결과:형광조영시망막포편현시,A조정개시망막혈관분포정균균망상;B、C조시망막중주부구정견대편무관주구,견신생혈관총,반형광삼루;D조무관주구교B,C조명현감소,주변부모세혈관망기본정상,신생혈관총명현감소.면역조직화학염색현시,A조HIF-1α단백표체강성;B,C조재신경절세포층정양성표체;D조재신경절세포층정약양성표체,교B,C조명현감소.결론:채용파리체강주사,통과지질체개도HIF-1α siRNA중조질립pSUPERsiHIF-1α 전염시망막,유효지억제료결양유도적소서시망막신생혈관모형시망막중HIF-1α 단백질적농체급시망막신생혈관적형성.
