西北农林科技大学学报（自然科学版）
西北農林科技大學學報（自然科學版）
서북농림과기대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF NORTHWEST SCI-TECH UNIVERSITY OF AGRICULTURE AND FORESTRY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2006年
2期
1-6,11
,共7页
于海生%华进联%王洪锋%杨炜峰%刘胜%蒋会婷%窦忠英
于海生%華進聯%王洪鋒%楊煒峰%劉勝%蔣會婷%竇忠英
우해생%화진련%왕홍봉%양위봉%류성%장회정%두충영
原始生殖细胞%胚胎干细胞%白血病抑制因子%条件培养液%人
原始生殖細胞%胚胎榦細胞%白血病抑製因子%條件培養液%人
원시생식세포%배태간세포%백혈병억제인자%조건배양액%인
为了探讨人原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)的体外分离培养条件及相关影响因素,以小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)作为饲养层,室温下用1.25 g/L胰蛋白酶+0.2 g/L EDTA消化人胚胎组织5～9 min,或用1 g/L胶原酶(Ⅳ型)消化20～40 min,分离得到PGCs,然后用不同培养液培养,从培养液角度较为系统的研究原代培养人原始生殖细胞的条件.结果表明,在KSR培养液(体积分数15 % Knockout serum replacement+高糖DMEM+10 ng/mL人重组白血病抑制因子(LIF)+4 ng/mL人重组碱性成纤维细胞生长因子+10 ng/mL Forskolin)和STO(建系的小鼠胚胎成纤维细胞)条件培养液中培养的原代人原始生殖细胞,有较高的克隆形成率;培养液中添加不同质量浓度的LIF对克隆形成率影响差异不大.
為瞭探討人原始生殖細胞(primordial germ cells,PGCs)的體外分離培養條件及相關影響因素,以小鼠胚胎成纖維細胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)作為飼養層,室溫下用1.25 g/L胰蛋白酶+0.2 g/L EDTA消化人胚胎組織5～9 min,或用1 g/L膠原酶(Ⅳ型)消化20～40 min,分離得到PGCs,然後用不同培養液培養,從培養液角度較為繫統的研究原代培養人原始生殖細胞的條件.結果錶明,在KSR培養液(體積分數15 % Knockout serum replacement+高糖DMEM+10 ng/mL人重組白血病抑製因子(LIF)+4 ng/mL人重組堿性成纖維細胞生長因子+10 ng/mL Forskolin)和STO(建繫的小鼠胚胎成纖維細胞)條件培養液中培養的原代人原始生殖細胞,有較高的剋隆形成率;培養液中添加不同質量濃度的LIF對剋隆形成率影響差異不大.
위료탐토인원시생식세포(primordial germ cells,PGCs)적체외분리배양조건급상관영향인소,이소서배태성섬유세포(mouse embryonic fibroblasts,MEF)작위사양층,실온하용1.25 g/L이단백매+0.2 g/L EDTA소화인배태조직5～9 min,혹용1 g/L효원매(Ⅳ형)소화20～40 min,분리득도PGCs,연후용불동배양액배양,종배양액각도교위계통적연구원대배양인원시생식세포적조건.결과표명,재KSR배양액(체적분수15 % Knockout serum replacement+고당DMEM+10 ng/mL인중조백혈병억제인자(LIF)+4 ng/mL인중조감성성섬유세포생장인자+10 ng/mL Forskolin)화STO(건계적소서배태성섬유세포)조건배양액중배양적원대인원시생식세포,유교고적극륭형성솔;배양액중첨가불동질량농도적LIF대극륭형성솔영향차이불대.
