贵州大学学报（自然科学版）
貴州大學學報（自然科學版）
귀주대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF GUIZHOU UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE)
2012年
3期
26-29
,共4页
易卉玲%许晓利%叶雁杰%柳威%舒细记
易卉玲%許曉利%葉雁傑%柳威%舒細記
역훼령%허효리%협안걸%류위%서세기
人PSF蛋白%pEGFP-N1%真核表达载体%融合蛋白
人PSF蛋白%pEGFP-N1%真覈錶達載體%融閤蛋白
인PSF단백%pEGFP-N1%진핵표체재체%융합단백
目的是构建人PSF基因真核表达载体pEGFP-N1-PSF,并在检测其在CHO细胞株中的表达情况.应用DNA重组技术和PCR方法从人宫颈癌Hela细胞中扩增PSF基因,插入pEGFPNL真核表达载体,构建重组质粒pEGFP-N1-PSF并测序鉴定.将pEGFP-N1-PSF瞬时转染CHO细胞,通过Western blot和RT-PCR方法检测PSF的表达,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达.结果CHO细胞转染pEGFP-N1-PSF真核表达载体后,RT-PCR和Western blot实验发现,在RNA和蛋白水平有PSF的表达,在荧光显微镜下可以观察到融合蛋白EGFP/PSF的表达.成功构建pEGFP-N1-PSF真核表达载体,证实其在CHO细胞中可以表达.
目的是構建人PSF基因真覈錶達載體pEGFP-N1-PSF,併在檢測其在CHO細胞株中的錶達情況.應用DNA重組技術和PCR方法從人宮頸癌Hela細胞中擴增PSF基因,插入pEGFPNL真覈錶達載體,構建重組質粒pEGFP-N1-PSF併測序鑒定.將pEGFP-N1-PSF瞬時轉染CHO細胞,通過Western blot和RT-PCR方法檢測PSF的錶達,熒光顯微鏡下觀察綠色熒光蛋白錶達.結果CHO細胞轉染pEGFP-N1-PSF真覈錶達載體後,RT-PCR和Western blot實驗髮現,在RNA和蛋白水平有PSF的錶達,在熒光顯微鏡下可以觀察到融閤蛋白EGFP/PSF的錶達.成功構建pEGFP-N1-PSF真覈錶達載體,證實其在CHO細胞中可以錶達.
목적시구건인PSF기인진핵표체재체pEGFP-N1-PSF,병재검측기재CHO세포주중적표체정황.응용DNA중조기술화PCR방법종인궁경암Hela세포중확증PSF기인,삽입pEGFPNL진핵표체재체,구건중조질립pEGFP-N1-PSF병측서감정.장pEGFP-N1-PSF순시전염CHO세포,통과Western blot화RT-PCR방법검측PSF적표체,형광현미경하관찰록색형광단백표체.결과CHO세포전염pEGFP-N1-PSF진핵표체재체후,RT-PCR화Western blot실험발현,재RNA화단백수평유PSF적표체,재형광현미경하가이관찰도융합단백EGFP/PSF적표체.성공구건pEGFP-N1-PSF진핵표체재체,증실기재CHO세포중가이표체.
