现代肿瘤医学
現代腫瘤醫學
현대종류의학
JOURNAL OF MODERN ONCOLOGY
2005年
1期
4-7
,共4页
孙立军%毕锋%潘阳林%刘娜%梁洁%张国云%乔泰东%樊代明
孫立軍%畢鋒%潘暘林%劉娜%樑潔%張國雲%喬泰東%樊代明
손립군%필봉%반양림%류나%량길%장국운%교태동%번대명
RhoB%胃癌%可诱导表达载体
RhoB%胃癌%可誘導錶達載體
RhoB%위암%가유도표체재체
目的研究RhoB对胃癌细胞SGC7901增殖调控作用.方法用PCR扩增出RhoB的全长cDNA,构建RhoB可诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB;脂质体介导法将调控载体pSwitch及诱导表达载体pGene/V5-His-RhoB先后转入人胃癌细胞SGC7901中,筛选出稳定抗性克隆;Western blot检测米非斯酮诱导后转染细胞中RhoB蛋白的表达.用MTT assay检测RhoB转染细胞株的生长速度、双苯并咪唑染料(Hoechst 33258)活细胞吸收分析法、流式细胞仪(FCM)检测RhoB对胃癌细胞凋亡指数作用.结果成功构建RhoB可诱导真核表达载体pGene/V5-His-RhoB,并经酶切和测序鉴定;转染后经潮霉素B和Zeocin筛选出稳定抗性克隆SGC7901/RhoB;米非斯酮诱导出RhoB蛋白表达,在诱导24小时后蛋白表达最高;细胞增殖试验结果显示,RhoB表达上调后胃癌细胞增殖受到抑制;细胞凋亡检测提示高表达RhoB可明显诱导胃癌细胞凋亡.结论 RhoB对胃癌细胞增殖具有负性调控作用,可诱导胃癌细胞出现凋亡.
目的研究RhoB對胃癌細胞SGC7901增殖調控作用.方法用PCR擴增齣RhoB的全長cDNA,構建RhoB可誘導錶達載體pGene/V5-His-RhoB;脂質體介導法將調控載體pSwitch及誘導錶達載體pGene/V5-His-RhoB先後轉入人胃癌細胞SGC7901中,篩選齣穩定抗性剋隆;Western blot檢測米非斯酮誘導後轉染細胞中RhoB蛋白的錶達.用MTT assay檢測RhoB轉染細胞株的生長速度、雙苯併咪唑染料(Hoechst 33258)活細胞吸收分析法、流式細胞儀(FCM)檢測RhoB對胃癌細胞凋亡指數作用.結果成功構建RhoB可誘導真覈錶達載體pGene/V5-His-RhoB,併經酶切和測序鑒定;轉染後經潮黴素B和Zeocin篩選齣穩定抗性剋隆SGC7901/RhoB;米非斯酮誘導齣RhoB蛋白錶達,在誘導24小時後蛋白錶達最高;細胞增殖試驗結果顯示,RhoB錶達上調後胃癌細胞增殖受到抑製;細胞凋亡檢測提示高錶達RhoB可明顯誘導胃癌細胞凋亡.結論 RhoB對胃癌細胞增殖具有負性調控作用,可誘導胃癌細胞齣現凋亡.
목적연구RhoB대위암세포SGC7901증식조공작용.방법용PCR확증출RhoB적전장cDNA,구건RhoB가유도표체재체pGene/V5-His-RhoB;지질체개도법장조공재체pSwitch급유도표체재체pGene/V5-His-RhoB선후전입인위암세포SGC7901중,사선출은정항성극륭;Western blot검측미비사동유도후전염세포중RhoB단백적표체.용MTT assay검측RhoB전염세포주적생장속도、쌍분병미서염료(Hoechst 33258)활세포흡수분석법、류식세포의(FCM)검측RhoB대위암세포조망지수작용.결과성공구건RhoB가유도진핵표체재체pGene/V5-His-RhoB,병경매절화측서감정;전염후경조매소B화Zeocin사선출은정항성극륭SGC7901/RhoB;미비사동유도출RhoB단백표체,재유도24소시후단백표체최고;세포증식시험결과현시,RhoB표체상조후위암세포증식수도억제;세포조망검측제시고표체RhoB가명현유도위암세포조망.결론 RhoB대위암세포증식구유부성조공작용,가유도위암세포출현조망.
