生物工程学报
生物工程學報
생물공정학보
CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY
2004年
4期
584-589
,共6页
硫酸软骨素裂解酶%分离纯化%固定化酶%海藻酸钠%纤维素
硫痠軟骨素裂解酶%分離純化%固定化酶%海藻痠鈉%纖維素
류산연골소렬해매%분리순화%고정화매%해조산납%섬유소
通过硫酸铵沉淀、QAE-Sephadex A50柱层析及Sephadex G-150凝胶过滤等纯化步骤,对源自温和气单孢菌YH311的ChSase进行了分离纯化.结果表明,ChSase经上述纯化步骤后被纯化了55倍,其最终纯度可达95%以上,比活为31.86u/mg.经SDS-PAGE及IFE测定可知该酶的分子量约为80kD,等电点为4.3～4.8.将纯化后的ChSase用海藻酸钠或纤维素固定化后,ChSase的热稳定性及贮存稳定性均可得到大幅度的提高:固定化酶用80℃水浴处理120min或于4℃冰箱放置30d后仍可保留50%以上的相对活力;但固定化酶的收率较低,仅为18.56%和18.86%.
通過硫痠銨沉澱、QAE-Sephadex A50柱層析及Sephadex G-150凝膠過濾等純化步驟,對源自溫和氣單孢菌YH311的ChSase進行瞭分離純化.結果錶明,ChSase經上述純化步驟後被純化瞭55倍,其最終純度可達95%以上,比活為31.86u/mg.經SDS-PAGE及IFE測定可知該酶的分子量約為80kD,等電點為4.3～4.8.將純化後的ChSase用海藻痠鈉或纖維素固定化後,ChSase的熱穩定性及貯存穩定性均可得到大幅度的提高:固定化酶用80℃水浴處理120min或于4℃冰箱放置30d後仍可保留50%以上的相對活力;但固定化酶的收率較低,僅為18.56%和18.86%.
통과류산안침정、QAE-Sephadex A50주층석급Sephadex G-150응효과려등순화보취,대원자온화기단포균YH311적ChSase진행료분리순화.결과표명,ChSase경상술순화보취후피순화료55배,기최종순도가체95%이상,비활위31.86u/mg.경SDS-PAGE급IFE측정가지해매적분자량약위80kD,등전점위4.3～4.8.장순화후적ChSase용해조산납혹섬유소고정화후,ChSase적열은정성급저존은정성균가득도대폭도적제고:고정화매용80℃수욕처리120min혹우4℃빙상방치30d후잉가보류50%이상적상대활력;단고정화매적수솔교저,부위18.56%화18.86%.
