微生物学报
微生物學報
미생물학보
ACTA MICROBIOLOGICA SINICA
2001年
2期
133-140
,共8页
王啸波%唐玉秋%王金华%黄仪秀%陈润生%黄力
王嘯波%唐玉鞦%王金華%黃儀秀%陳潤生%黃力
왕소파%당옥추%왕금화%황의수%진윤생%황력
环境样品%DNA分离纯化%混合基因组DNA文库%未培养微生物
環境樣品%DNA分離純化%混閤基因組DNA文庫%未培養微生物
배경양품%DNA분리순화%혼합기인조DNA문고%미배양미생물
采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理等理化方法,直接从性质不同的环境样品中提取和纯化混合基因组DNA.所获得纯品DNA的产量为每克样品2~16ug.对纯品DNA进行限制性内切酶处理后,构建了以pUC18为载体的DNA文库.建库效率为从每克环境样品获得约103~104个含3~8kb外源随机插入片段的克隆.通过DNA序列测定和基因注释,对从文库中随机选取的克隆进行了分析,发现外源插入片段均含序列未见报道的新基因.本文所做的尝试对于保存、研究和开发未培养微生物基因资源具有意义.
採用研磨/凍融和SDS/蛋白酶K熱處理等理化方法,直接從性質不同的環境樣品中提取和純化混閤基因組DNA.所穫得純品DNA的產量為每剋樣品2~16ug.對純品DNA進行限製性內切酶處理後,構建瞭以pUC18為載體的DNA文庫.建庫效率為從每剋環境樣品穫得約103~104箇含3~8kb外源隨機插入片段的剋隆.通過DNA序列測定和基因註釋,對從文庫中隨機選取的剋隆進行瞭分析,髮現外源插入片段均含序列未見報道的新基因.本文所做的嘗試對于保存、研究和開髮未培養微生物基因資源具有意義.
채용연마/동융화SDS/단백매K열처리등이화방법,직접종성질불동적배경양품중제취화순화혼합기인조DNA.소획득순품DNA적산량위매극양품2~16ug.대순품DNA진행한제성내절매처리후,구건료이pUC18위재체적DNA문고.건고효솔위종매극배경양품획득약103~104개함3~8kb외원수궤삽입편단적극륭.통과DNA서렬측정화기인주석,대종문고중수궤선취적극륭진행료분석,발현외원삽입편단균함서렬미견보도적신기인.본문소주적상시대우보존、연구화개발미배양미생물기인자원구유의의.