中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2001年
1期
89-96
,共8页
杨挥%黄有国%张旭家%杨福愉
楊揮%黃有國%張旭傢%楊福愉
양휘%황유국%장욱가%양복유
CL%非双层脂结构形成的倾向性%重建Fo%质子转运活性%构象
CL%非雙層脂結構形成的傾嚮性%重建Fo%質子轉運活性%構象
CL%비쌍층지결구형성적경향성%중건Fo%질자전운활성%구상
从猪心线粒体纯化了FoF1-ATPase的膜部分质子通道Fo, SDS-PAGE表明纯度约85%, 且不含F1-ATPase的各亚基. 将纯化的Fo在含不同纯磷脂组分的脂质体上重 建, 分别测定心磷脂(CL)、磷脂酸(PA)、磷脂酰肌醇(PI)和磷脂酰丝氨酸(PS)等酸性磷脂对重建Fo质子转运活性的影响, 结果表明, 它们促进重建Fo质子转运活性的强弱顺序是CL＞PA＞＞ PI, 而PS却完全抑制重建Fo的质子转运. 阿霉素(ADM)显著抑制含CL的重建Fo的质子转运活性, 提示CL明显促进Fo的质子转运可能与其具有强烈的形成非双层脂结构的倾向性相关. 测定磷脂酰乙醇胺(PE)及二顺油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)、二反油酰磷脂酰乙醇胺(DEPE)对重建Fo质子转运活性的影响表明, 有形成非双层脂结构倾向性的PE, DOPE明显促进重建Fo的质子转运. 荧光猝灭剂HB对重建Fo的内源荧光猝灭及专一性标记蛋白质巯基的荧光探剂acrylodan的荧光光谱分析进一步表明, 适当浓度的CL可能使重建Fo具有适合的构象, 并表现高的质子转运活性.
從豬心線粒體純化瞭FoF1-ATPase的膜部分質子通道Fo, SDS-PAGE錶明純度約85%, 且不含F1-ATPase的各亞基. 將純化的Fo在含不同純燐脂組分的脂質體上重 建, 分彆測定心燐脂(CL)、燐脂痠(PA)、燐脂酰肌醇(PI)和燐脂酰絲氨痠(PS)等痠性燐脂對重建Fo質子轉運活性的影響, 結果錶明, 它們促進重建Fo質子轉運活性的彊弱順序是CL＞PA＞＞ PI, 而PS卻完全抑製重建Fo的質子轉運. 阿黴素(ADM)顯著抑製含CL的重建Fo的質子轉運活性, 提示CL明顯促進Fo的質子轉運可能與其具有彊烈的形成非雙層脂結構的傾嚮性相關. 測定燐脂酰乙醇胺(PE)及二順油酰燐脂酰乙醇胺(DOPE)、二反油酰燐脂酰乙醇胺(DEPE)對重建Fo質子轉運活性的影響錶明, 有形成非雙層脂結構傾嚮性的PE, DOPE明顯促進重建Fo的質子轉運. 熒光猝滅劑HB對重建Fo的內源熒光猝滅及專一性標記蛋白質巰基的熒光探劑acrylodan的熒光光譜分析進一步錶明, 適噹濃度的CL可能使重建Fo具有適閤的構象, 併錶現高的質子轉運活性.
종저심선립체순화료FoF1-ATPase적막부분질자통도Fo, SDS-PAGE표명순도약85%, 차불함F1-ATPase적각아기. 장순화적Fo재함불동순린지조분적지질체상중 건, 분별측정심린지(CL)、린지산(PA)、린지선기순(PI)화린지선사안산(PS)등산성린지대중건Fo질자전운활성적영향, 결과표명, 타문촉진중건Fo질자전운활성적강약순서시CL＞PA＞＞ PI, 이PS각완전억제중건Fo적질자전운. 아매소(ADM)현저억제함CL적중건Fo적질자전운활성, 제시CL명현촉진Fo적질자전운가능여기구유강렬적형성비쌍층지결구적경향성상관. 측정린지선을순알(PE)급이순유선린지선을순알(DOPE)、이반유선린지선을순알(DEPE)대중건Fo질자전운활성적영향표명, 유형성비쌍층지결구경향성적PE, DOPE명현촉진중건Fo적질자전운. 형광졸멸제HB대중건Fo적내원형광졸멸급전일성표기단백질구기적형광탐제acrylodan적형광광보분석진일보표명, 괄당농도적CL가능사중건Fo구유괄합적구상, 병표현고적질자전운활성.
