科学通报
科學通報
과학통보
CHINESE SCIENCE BULLETIN
2000年
21期
2316-2321
,共6页
吴丽芳%李红%冯慧云%吴李君%余增亮
吳麗芳%李紅%馮慧雲%吳李君%餘增亮
오려방%리홍%풍혜운%오리군%여증량
低能氩离子束%几丁质酶基因%小麦成熟胚%转基因植株%赤霉病抗性
低能氬離子束%幾丁質酶基因%小麥成熟胚%轉基因植株%赤黴病抗性
저능아리자속%궤정질매기인%소맥성숙배%전기인식주%적매병항성
用低能氩离子束介导将构建的pCAMBIA1308质粒载体上携带的几丁质酶基因(RCH8)导入3个小麦栽培品种扬麦158, 皖9210, 皖麦32号的成熟胚细胞. 来自成熟胚的初生愈伤组织首先经过含有20～30 mg/L潮霉素(hygromycin, Hm)的培养基的筛选培养, 获得的抗性愈伤组织转入Hm浓度为10～20 mg/L的培养基上进行分化培养, 3个小麦品种都获得了再生植株. 再生苗PCR和PCR-Southern检测结果显示, 绝大部分再生植株为阳性的转化植株. Southern杂交检测表明外源RCH8基因已整合到小麦基因组中. 植株转化率在不同品种间有所不同, 同一品种经不同剂量的氩离子束注入后, 转化效果也存在较大差异: 皖麦32号最高转化率可达3.8%; 扬麦158在5种离子注入剂量下的转化率为0.5%～2.5%; 皖9210的转化率为0.5%～1.4%. 对转化二代植株中几丁质酶基因的表达情况的检测结果显示, 有两个转化株系的幼苗叶片细胞粗提液对两种小麦赤霉病菌毒菌株表现出抗性.
用低能氬離子束介導將構建的pCAMBIA1308質粒載體上攜帶的幾丁質酶基因(RCH8)導入3箇小麥栽培品種颺麥158, 皖9210, 皖麥32號的成熟胚細胞. 來自成熟胚的初生愈傷組織首先經過含有20～30 mg/L潮黴素(hygromycin, Hm)的培養基的篩選培養, 穫得的抗性愈傷組織轉入Hm濃度為10～20 mg/L的培養基上進行分化培養, 3箇小麥品種都穫得瞭再生植株. 再生苗PCR和PCR-Southern檢測結果顯示, 絕大部分再生植株為暘性的轉化植株. Southern雜交檢測錶明外源RCH8基因已整閤到小麥基因組中. 植株轉化率在不同品種間有所不同, 同一品種經不同劑量的氬離子束註入後, 轉化效果也存在較大差異: 皖麥32號最高轉化率可達3.8%; 颺麥158在5種離子註入劑量下的轉化率為0.5%～2.5%; 皖9210的轉化率為0.5%～1.4%. 對轉化二代植株中幾丁質酶基因的錶達情況的檢測結果顯示, 有兩箇轉化株繫的幼苗葉片細胞粗提液對兩種小麥赤黴病菌毒菌株錶現齣抗性.
용저능아리자속개도장구건적pCAMBIA1308질립재체상휴대적궤정질매기인(RCH8)도입3개소맥재배품충양맥158, 환9210, 환맥32호적성숙배세포. 래자성숙배적초생유상조직수선경과함유20～30 mg/L조매소(hygromycin, Hm)적배양기적사선배양, 획득적항성유상조직전입Hm농도위10～20 mg/L적배양기상진행분화배양, 3개소맥품충도획득료재생식주. 재생묘PCR화PCR-Southern검측결과현시, 절대부분재생식주위양성적전화식주. Southern잡교검측표명외원RCH8기인이정합도소맥기인조중. 식주전화솔재불동품충간유소불동, 동일품충경불동제량적아리자속주입후, 전화효과야존재교대차이: 환맥32호최고전화솔가체3.8%; 양맥158재5충리자주입제량하적전화솔위0.5%～2.5%; 환9210적전화솔위0.5%～1.4%. 대전화이대식주중궤정질매기인적표체정황적검측결과현시, 유량개전화주계적유묘협편세포조제액대량충소맥적매병균독균주표현출항성.
