中国兽医学报
中國獸醫學報
중국수의학보
CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE
1999年
2期
156-160
,共5页
王祥生%刘小芳%刘俊华%赵文忠%刘全%董文其%曲利芝
王祥生%劉小芳%劉俊華%趙文忠%劉全%董文其%麯利芝
왕상생%류소방%류준화%조문충%류전%동문기%곡리지
伊氏锥虫%HGPRT缺陷株%驯化%生物学特性%超微结构
伊氏錐蟲%HGPRT缺陷株%馴化%生物學特性%超微結構
이씨추충%HGPRT결함주%순화%생물학특성%초미결구
为了获得伊氏锥虫次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)缺陷株,用不同浓度的8-氮鸟嘌呤(8-AG)和8-AG加紫外线照射的方法,对伊氏锥虫体外培养株进行了为期60～101 d诱导驯化. 结果,以每毫升含8-AG 40 μg的培养液培养驯化,再配合紫外线照射,以及以每毫升含8-AG 60 μg的培养液培养驯化,均获得了伊氏锥虫HGPRT缺陷株.试验表明,培养虫体经过2～3个死亡期后逐步进入适应期,虫数升高到(1.5～2.5)×106/mL,饲养细胞通常于2～5 d变黑、崩解,应适时更换.培养驯化的13株克隆虫株,经6-巯基鸟嘌呤(6-TG)抗性测定,10株存活.克隆株在3倍量氨基喋呤的HAT选择性培养液中死亡.生物学试验表明,HGPRT缺陷株在无HT的培养液中生长良好,对小鼠致病力有下隆的趋势,虫血症和小鼠死亡时间比对照组延长1倍多.抗体凝集试验表明,HGPRT缺陷株未发生抗原变异现象.超微结构显示,HGPRT缺陷株的动基体、核和核仁比对照组明显增大,核膜电子密度区也明显增宽.
為瞭穫得伊氏錐蟲次黃嘌呤鳥嘌呤燐痠覈糖轉化酶(HGPRT)缺陷株,用不同濃度的8-氮鳥嘌呤(8-AG)和8-AG加紫外線照射的方法,對伊氏錐蟲體外培養株進行瞭為期60～101 d誘導馴化. 結果,以每毫升含8-AG 40 μg的培養液培養馴化,再配閤紫外線照射,以及以每毫升含8-AG 60 μg的培養液培養馴化,均穫得瞭伊氏錐蟲HGPRT缺陷株.試驗錶明,培養蟲體經過2～3箇死亡期後逐步進入適應期,蟲數升高到(1.5～2.5)×106/mL,飼養細胞通常于2～5 d變黑、崩解,應適時更換.培養馴化的13株剋隆蟲株,經6-巰基鳥嘌呤(6-TG)抗性測定,10株存活.剋隆株在3倍量氨基喋呤的HAT選擇性培養液中死亡.生物學試驗錶明,HGPRT缺陷株在無HT的培養液中生長良好,對小鼠緻病力有下隆的趨勢,蟲血癥和小鼠死亡時間比對照組延長1倍多.抗體凝集試驗錶明,HGPRT缺陷株未髮生抗原變異現象.超微結構顯示,HGPRT缺陷株的動基體、覈和覈仁比對照組明顯增大,覈膜電子密度區也明顯增寬.
위료획득이씨추충차황표령조표령린산핵당전화매(HGPRT)결함주,용불동농도적8-담조표령(8-AG)화8-AG가자외선조사적방법,대이씨추충체외배양주진행료위기60～101 d유도순화. 결과,이매호승함8-AG 40 μg적배양액배양순화,재배합자외선조사,이급이매호승함8-AG 60 μg적배양액배양순화,균획득료이씨추충HGPRT결함주.시험표명,배양충체경과2～3개사망기후축보진입괄응기,충수승고도(1.5～2.5)×106/mL,사양세포통상우2～5 d변흑、붕해,응괄시경환.배양순화적13주극륭충주,경6-구기조표령(6-TG)항성측정,10주존활.극륭주재3배량안기첩령적HAT선택성배양액중사망.생물학시험표명,HGPRT결함주재무HT적배양액중생장량호,대소서치병력유하륭적추세,충혈증화소서사망시간비대조조연장1배다.항체응집시험표명,HGPRT결함주미발생항원변이현상.초미결구현시,HGPRT결함주적동기체、핵화핵인비대조조명현증대,핵막전자밀도구야명현증관.
