安徽农业大学学报
安徽農業大學學報
안휘농업대학학보
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL UNIVERSITY
2003年
2期
178-181
,共4页
张水明%宋丰顺%巩雪梅%杨振江%黄永峰%朱立武
張水明%宋豐順%鞏雪梅%楊振江%黃永峰%硃立武
장수명%송봉순%공설매%양진강%황영봉%주립무
砀山酥梨%基因组DNA%RAPD
碭山酥梨%基因組DNA%RAPD
탕산소리%기인조DNA%RAPD
分别以砀山酥梨不同品系的成熟叶片、幼叶和芽为材料,采用SDS法提取基因组DNA,比较了不同材料的提取效果,并以此为模板进行RAPD反应,优化了RAPD反应条件.结果表明:用幼叶和芽均能提取高质量的基因组DNA,可直接用于RAPD分析,而用成熟叶片虽能提取到基因组DNA,但不能直接用于RAPD分析;优化的RAPD反应体系为:反应体积50 μL,包含80 ng左右模板DNA、5 μL市售10×PCR Buffer、2.0 mmol/L MgCl2、120 μmol/L dNTPs、3U的Taq酶、0.5 μmol/L随机引物;热循环程序为94℃预变性5 min,使模板DNA充分变性,然后进入下列温度循环,94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸90 s,循环数40,最后72℃延伸7 min.
分彆以碭山酥梨不同品繫的成熟葉片、幼葉和芽為材料,採用SDS法提取基因組DNA,比較瞭不同材料的提取效果,併以此為模闆進行RAPD反應,優化瞭RAPD反應條件.結果錶明:用幼葉和芽均能提取高質量的基因組DNA,可直接用于RAPD分析,而用成熟葉片雖能提取到基因組DNA,但不能直接用于RAPD分析;優化的RAPD反應體繫為:反應體積50 μL,包含80 ng左右模闆DNA、5 μL市售10×PCR Buffer、2.0 mmol/L MgCl2、120 μmol/L dNTPs、3U的Taq酶、0.5 μmol/L隨機引物;熱循環程序為94℃預變性5 min,使模闆DNA充分變性,然後進入下列溫度循環,94℃變性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸90 s,循環數40,最後72℃延伸7 min.
분별이탕산소리불동품계적성숙협편、유협화아위재료,채용SDS법제취기인조DNA,비교료불동재료적제취효과,병이차위모판진행RAPD반응,우화료RAPD반응조건.결과표명:용유협화아균능제취고질량적기인조DNA,가직접용우RAPD분석,이용성숙협편수능제취도기인조DNA,단불능직접용우RAPD분석;우화적RAPD반응체계위:반응체적50 μL,포함80 ng좌우모판DNA、5 μL시수10×PCR Buffer、2.0 mmol/L MgCl2、120 μmol/L dNTPs、3U적Taq매、0.5 μmol/L수궤인물;열순배정서위94℃예변성5 min,사모판DNA충분변성,연후진입하렬온도순배,94℃변성30 s,36℃퇴화45 s,72℃연신90 s,순배수40,최후72℃연신7 min.
