上海农业学报
上海農業學報
상해농업학보
ACTA AGRICULTURAE SHANGHAI
2003年
2期
1-4
,共4页
熊爱生%彭日荷%耿其芳%李贤%范惠琴%姚泉洪
熊愛生%彭日荷%耿其芳%李賢%範惠琴%姚泉洪
웅애생%팽일하%경기방%리현%범혜금%요천홍
儿茶酚双加氧酶基因%克隆%表达%酶活分析
兒茶酚雙加氧酶基因%剋隆%錶達%酶活分析
인다분쌍가양매기인%극륭%표체%매활분석
从恶臭假单孢菌(Pseudomonas sp. S-47)的DNA中扩增得到924bp编码儿茶酚双加氧酶的基因片段,将其构建入pBluescript SK载体BamHI和SacI位点间.测序结果显示与Kim(2000)报道一致.将该基因插入带庆大霉素抗性基因启动子和t1t2终止子载体pG251、分别带ompA和EAP信号肽、lpp和Gmr启动子载体pYF395和pYF5254中,构建组成型表达载体pG251,分泌型表达载体pYFX1,pYFX2.酶活测定结果显示pG251为665mu/mL,pYFX1,pYFX2分别为1815mu/mL,1015mu/mL.SDS-PAGE电泳显示表达蛋白产物的分子量约为35kD.分泌型表达载体pYFX1表达量大于pYFX2,组成型表达载体pGX1由于使用弱启动子表达量较低.
從噁臭假單孢菌(Pseudomonas sp. S-47)的DNA中擴增得到924bp編碼兒茶酚雙加氧酶的基因片段,將其構建入pBluescript SK載體BamHI和SacI位點間.測序結果顯示與Kim(2000)報道一緻.將該基因插入帶慶大黴素抗性基因啟動子和t1t2終止子載體pG251、分彆帶ompA和EAP信號肽、lpp和Gmr啟動子載體pYF395和pYF5254中,構建組成型錶達載體pG251,分泌型錶達載體pYFX1,pYFX2.酶活測定結果顯示pG251為665mu/mL,pYFX1,pYFX2分彆為1815mu/mL,1015mu/mL.SDS-PAGE電泳顯示錶達蛋白產物的分子量約為35kD.分泌型錶達載體pYFX1錶達量大于pYFX2,組成型錶達載體pGX1由于使用弱啟動子錶達量較低.
종악취가단포균(Pseudomonas sp. S-47)적DNA중확증득도924bp편마인다분쌍가양매적기인편단,장기구건입pBluescript SK재체BamHI화SacI위점간.측서결과현시여Kim(2000)보도일치.장해기인삽입대경대매소항성기인계동자화t1t2종지자재체pG251、분별대ompA화EAP신호태、lpp화Gmr계동자재체pYF395화pYF5254중,구건조성형표체재체pG251,분비형표체재체pYFX1,pYFX2.매활측정결과현시pG251위665mu/mL,pYFX1,pYFX2분별위1815mu/mL,1015mu/mL.SDS-PAGE전영현시표체단백산물적분자량약위35kD.분비형표체재체pYFX1표체량대우pYFX2,조성형표체재체pGX1유우사용약계동자표체량교저.
