[目的] 为了检验海参营养素是否具有抗疲劳作用,进行了此项研究.[方法] 首先进行剂量分组,按推荐人体日摄入量(2 g/60 kg体重)的30倍、20倍、10倍设计,分3个实验组及蒸馏水对照组.管饲法染毒.动物实验室温度(25±2)℃,每日称体重后灌胃1次,连续30 d后分别测定以下各项抗疲劳作用指标.小鼠负重游泳试验:末次给予受试物30 min后,称体重,鼠尾根部负荷5%体重铅皮,置于游泳箱中游泳.记录自游泳开始至死亡时间(min);肝糖原测定(蒽酮法):末次给予受试物30 min后处死,取肝脏,称取200 mg.加入4.0 ml TCA,每管匀浆1 min,将匀浆液3 000 r/min离心15 min,把上清液移至另一试管内,在沉淀中再加入4.0 ml TCA,匀浆1 min,再离心15 min.合并混匀两次上清液.取1.0 ml上清液放入10 ml离心管中,每管加入95%乙醇4.0 ml,充分混匀,加塞,室温下竖立放置过液,沉淀完全后,3 000 r/min离心15 min,弃去上清液,使试管倒立10 min.用2.0 ml蒸馏水溶解肝糖原,将10.0 ml蒽酮试剂用力加入各管,放入沸水浴15 min,再移至冷水浴,冷却至室温,在波长620 nm处比色,用空白管调零,计算肝糖原含量.血乳酸测定:末次给予受试物30 min后,尾根部负重,置于游泳箱中游泳.第60 min取出,静止15 min,摘眼球采血.于5 ml试管中加入0.48 ml 1%NaF溶液,准确吸取全血20 μl加入试管底部,用试管上清液清洗微量吸管数次,再加入1.5 ml蛋白沉淀剂,振荡混匀.于3 000 r/min离心10 min,取上清液0.5 ml加入沉淀管,取乳酸标准应用液0.5 ml加入标准管,取沉淀剂-NaF混合液0.5 ml加入空白管,向各管中加入0.1 ml 4%CuSO4,再加入3.0 ml浓硫酸,充分混匀,置沸水浴加热5 min,取出放入冰水浴冷却10 min,向各管中加入0.1 ml 1.5%对羟基联苯摇匀,置(30±1)℃水浴30 min,再放入沸水浴加热90 s,取出冷却至室温,在波长560 nm处用5 mm光径比色皿比色,空白管调零,计算血乳酸含量.血清尿素氮、血清乳酸脱氢酶、血糖测定,按试剂盒使用说明操作,用COBAS MIRA全自动生化分析仪测定.[结果] 海参营养素能延长小鼠的游泳时间,增加小鼠肝糖原含量,减少小鼠血乳酸含量,对小鼠血清尿素氮、乳酸脱氢酶、血糖作用不明显;对实验动物的体重增长无明显影响.[结论] 在本实验条件下,表明海参营养素可能具有一定的抗疲劳作用.
[目的] 為瞭檢驗海參營養素是否具有抗疲勞作用,進行瞭此項研究.[方法] 首先進行劑量分組,按推薦人體日攝入量(2 g/60 kg體重)的30倍、20倍、10倍設計,分3箇實驗組及蒸餾水對照組.管飼法染毒.動物實驗室溫度(25±2)℃,每日稱體重後灌胃1次,連續30 d後分彆測定以下各項抗疲勞作用指標.小鼠負重遊泳試驗:末次給予受試物30 min後,稱體重,鼠尾根部負荷5%體重鉛皮,置于遊泳箱中遊泳.記錄自遊泳開始至死亡時間(min);肝糖原測定(蒽酮法):末次給予受試物30 min後處死,取肝髒,稱取200 mg.加入4.0 ml TCA,每管勻漿1 min,將勻漿液3 000 r/min離心15 min,把上清液移至另一試管內,在沉澱中再加入4.0 ml TCA,勻漿1 min,再離心15 min.閤併混勻兩次上清液.取1.0 ml上清液放入10 ml離心管中,每管加入95%乙醇4.0 ml,充分混勻,加塞,室溫下豎立放置過液,沉澱完全後,3 000 r/min離心15 min,棄去上清液,使試管倒立10 min.用2.0 ml蒸餾水溶解肝糖原,將10.0 ml蒽酮試劑用力加入各管,放入沸水浴15 min,再移至冷水浴,冷卻至室溫,在波長620 nm處比色,用空白管調零,計算肝糖原含量.血乳痠測定:末次給予受試物30 min後,尾根部負重,置于遊泳箱中遊泳.第60 min取齣,靜止15 min,摘眼毬採血.于5 ml試管中加入0.48 ml 1%NaF溶液,準確吸取全血20 μl加入試管底部,用試管上清液清洗微量吸管數次,再加入1.5 ml蛋白沉澱劑,振盪混勻.于3 000 r/min離心10 min,取上清液0.5 ml加入沉澱管,取乳痠標準應用液0.5 ml加入標準管,取沉澱劑-NaF混閤液0.5 ml加入空白管,嚮各管中加入0.1 ml 4%CuSO4,再加入3.0 ml濃硫痠,充分混勻,置沸水浴加熱5 min,取齣放入冰水浴冷卻10 min,嚮各管中加入0.1 ml 1.5%對羥基聯苯搖勻,置(30±1)℃水浴30 min,再放入沸水浴加熱90 s,取齣冷卻至室溫,在波長560 nm處用5 mm光徑比色皿比色,空白管調零,計算血乳痠含量.血清尿素氮、血清乳痠脫氫酶、血糖測定,按試劑盒使用說明操作,用COBAS MIRA全自動生化分析儀測定.[結果] 海參營養素能延長小鼠的遊泳時間,增加小鼠肝糖原含量,減少小鼠血乳痠含量,對小鼠血清尿素氮、乳痠脫氫酶、血糖作用不明顯;對實驗動物的體重增長無明顯影響.[結論] 在本實驗條件下,錶明海參營養素可能具有一定的抗疲勞作用.
[목적] 위료검험해삼영양소시부구유항피노작용,진행료차항연구.[방법] 수선진행제량분조,안추천인체일섭입량(2 g/60 kg체중)적30배、20배、10배설계,분3개실험조급증류수대조조.관사법염독.동물실험실온도(25±2)℃,매일칭체중후관위1차,련속30 d후분별측정이하각항항피노작용지표.소서부중유영시험:말차급여수시물30 min후,칭체중,서미근부부하5%체중연피,치우유영상중유영.기록자유영개시지사망시간(min);간당원측정(은동법):말차급여수시물30 min후처사,취간장,칭취200 mg.가입4.0 ml TCA,매관균장1 min,장균장액3 000 r/min리심15 min,파상청액이지령일시관내,재침정중재가입4.0 ml TCA,균장1 min,재리심15 min.합병혼균량차상청액.취1.0 ml상청액방입10 ml리심관중,매관가입95%을순4.0 ml,충분혼균,가새,실온하수립방치과액,침정완전후,3 000 r/min리심15 min,기거상청액,사시관도립10 min.용2.0 ml증류수용해간당원,장10.0 ml은동시제용력가입각관,방입비수욕15 min,재이지랭수욕,냉각지실온,재파장620 nm처비색,용공백관조령,계산간당원함량.혈유산측정:말차급여수시물30 min후,미근부부중,치우유영상중유영.제60 min취출,정지15 min,적안구채혈.우5 ml시관중가입0.48 ml 1%NaF용액,준학흡취전혈20 μl가입시관저부,용시관상청액청세미량흡관수차,재가입1.5 ml단백침정제,진탕혼균.우3 000 r/min리심10 min,취상청액0.5 ml가입침정관,취유산표준응용액0.5 ml가입표준관,취침정제-NaF혼합액0.5 ml가입공백관,향각관중가입0.1 ml 4%CuSO4,재가입3.0 ml농류산,충분혼균,치비수욕가열5 min,취출방입빙수욕냉각10 min,향각관중가입0.1 ml 1.5%대간기련분요균,치(30±1)℃수욕30 min,재방입비수욕가열90 s,취출냉각지실온,재파장560 nm처용5 mm광경비색명비색,공백관조령,계산혈유산함량.혈청뇨소담、혈청유산탈경매、혈당측정,안시제합사용설명조작,용COBAS MIRA전자동생화분석의측정.[결과] 해삼영양소능연장소서적유영시간,증가소서간당원함량,감소소서혈유산함량,대소서혈청뇨소담、유산탈경매、혈당작용불명현;대실험동물적체중증장무명현영향.[결론] 재본실험조건하,표명해삼영양소가능구유일정적항피노작용.
