药物生物技术
藥物生物技術
약물생물기술
PHARMACEUTICAL BIOTECHNOLOGY
2001年
6期
306-309
,共4页
重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物%大肠杆菌%诱导剂%T7启动子系统
重組人組織型纖溶酶原激活物衍生物%大腸桿菌%誘導劑%T7啟動子繫統
중조인조직형섬용매원격활물연생물%대장간균%유도제%T7계동자계통
重组人组织型纤溶酶原激活物衍生物(K2P)体内半衰期长优于天然tPA.在原核系统中直接表达K2P的表达量很低,仅5%左右,构建Trx-K2P融合蛋白后可将表达量提高至10%.为了进一步提高产量,使用诱导剂(IPTG)作为选择压力对重组菌株进行培养和筛选,获得了变异的宿主菌,有效地提高了融合蛋白在大肠杆菌T7启动子系统中的表达,诱导5h后表达量达到了28.8%.同时宿主菌获得了对诱导剂的耐受性,能在诱导后持续生长,最终增加了目的蛋白的产量.
重組人組織型纖溶酶原激活物衍生物(K2P)體內半衰期長優于天然tPA.在原覈繫統中直接錶達K2P的錶達量很低,僅5%左右,構建Trx-K2P融閤蛋白後可將錶達量提高至10%.為瞭進一步提高產量,使用誘導劑(IPTG)作為選擇壓力對重組菌株進行培養和篩選,穫得瞭變異的宿主菌,有效地提高瞭融閤蛋白在大腸桿菌T7啟動子繫統中的錶達,誘導5h後錶達量達到瞭28.8%.同時宿主菌穫得瞭對誘導劑的耐受性,能在誘導後持續生長,最終增加瞭目的蛋白的產量.
중조인조직형섬용매원격활물연생물(K2P)체내반쇠기장우우천연tPA.재원핵계통중직접표체K2P적표체량흔저,부5%좌우,구건Trx-K2P융합단백후가장표체량제고지10%.위료진일보제고산량,사용유도제(IPTG)작위선택압력대중조균주진행배양화사선,획득료변이적숙주균,유효지제고료융합단백재대장간균T7계동자계통중적표체,유도5h후표체량체도료28.8%.동시숙주균획득료대유도제적내수성,능재유도후지속생장,최종증가료목적단백적산량.
