生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2004年
2期
3-5
,共3页
孙彩军%潘善培%谢琪璇%肖銮娟%唐键
孫綵軍%潘善培%謝琪璇%肖鑾娟%唐鍵
손채군%반선배%사기선%초란연%당건
猪卯透明带%真核表达载体%DNA疫苗%免疫避孕
豬卯透明帶%真覈錶達載體%DNA疫苗%免疫避孕
저묘투명대%진핵표체재체%DNA역묘%면역피잉
目的:构建猪卵透明带ZP3α真核表达载体,为探讨卵透明带DNA疫苗避孕疫苗奠定基础.方法:采用PCR法获得了去除N端信号肽序列和C端跨膜区序列的猪卵透明带ZP3α的cDNA序列片段,以专门用于发展DNA疫苗的质粒pVAX1为载体构建了真核细胞表达质粒pVAXl-pZP3α.通过脂质体转染将之导入HeLa细胞进行体外瞬时表达,然后采用RT-PCR和间接免疫荧光技术(IIF)检测pZP3α在mRNA水平的转录和蛋白质水平上的表达.结果:真核细胞表达质粒pVAX1-pZP3α构建成功,用RT-PCR和IIF技术检测到了pZP3α在HeLa细胞中的转录与表达.结论:真核表达载体pVAX1-pZP3α的成功构建和表达为研制开发有效的人用卵透明带DNA避孕疫苗奠定了基础.
目的:構建豬卵透明帶ZP3α真覈錶達載體,為探討卵透明帶DNA疫苗避孕疫苗奠定基礎.方法:採用PCR法穫得瞭去除N耑信號肽序列和C耑跨膜區序列的豬卵透明帶ZP3α的cDNA序列片段,以專門用于髮展DNA疫苗的質粒pVAX1為載體構建瞭真覈細胞錶達質粒pVAXl-pZP3α.通過脂質體轉染將之導入HeLa細胞進行體外瞬時錶達,然後採用RT-PCR和間接免疫熒光技術(IIF)檢測pZP3α在mRNA水平的轉錄和蛋白質水平上的錶達.結果:真覈細胞錶達質粒pVAX1-pZP3α構建成功,用RT-PCR和IIF技術檢測到瞭pZP3α在HeLa細胞中的轉錄與錶達.結論:真覈錶達載體pVAX1-pZP3α的成功構建和錶達為研製開髮有效的人用卵透明帶DNA避孕疫苗奠定瞭基礎.
목적:구건저란투명대ZP3α진핵표체재체,위탐토란투명대DNA역묘피잉역묘전정기출.방법:채용PCR법획득료거제N단신호태서렬화C단과막구서렬적저란투명대ZP3α적cDNA서렬편단,이전문용우발전DNA역묘적질립pVAX1위재체구건료진핵세포표체질립pVAXl-pZP3α.통과지질체전염장지도입HeLa세포진행체외순시표체,연후채용RT-PCR화간접면역형광기술(IIF)검측pZP3α재mRNA수평적전록화단백질수평상적표체.결과:진핵세포표체질립pVAX1-pZP3α구건성공,용RT-PCR화IIF기술검측도료pZP3α재HeLa세포중적전록여표체.결론:진핵표체재체pVAX1-pZP3α적성공구건화표체위연제개발유효적인용란투명대DNA피잉역묘전정료기출.
