第四军医大学学报
第四軍醫大學學報
제사군의대학학보
JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2004年
19期
1768-1771
,共4页
杨向民%邢金良%姚西英%张思河%陈志南
楊嚮民%邢金良%姚西英%張思河%陳誌南
양향민%형금량%요서영%장사하%진지남
结直肠肿瘤%Fab抗体%克隆%表达
結直腸腫瘤%Fab抗體%剋隆%錶達
결직장종류%Fab항체%극륭%표체
目的:从杂交瘤细胞中克隆mAb CAb-1所编码Fab抗体基因,并在大肠杆菌中进行表达和鉴定.方法:采用RT-PCR方法,扩增mAb CAb-1的Fd片段和全长κ链基因,分别克隆到T载体后进行序列测定和分析.依次亚克隆两个基因到噬粒pComb3中,去除该载体上的gIII基因,构建成分泌表达载体Fd-L/pComb3.转化XL1-Blue E.coli菌株,IPTG诱导表达.采用ELISA和免疫荧光法检测表达产物的特异性.结果:克隆了大肠癌mAb CAb-1的Fab基因,并在E.coli中获得表达.产物CAb-1 Fab具有与大肠癌细胞株SW480特异结合的活性.结论:成功构建了在E.coli中表达抗人大肠癌mAb CAb-1的小分子单价Fab抗体的载体.
目的:從雜交瘤細胞中剋隆mAb CAb-1所編碼Fab抗體基因,併在大腸桿菌中進行錶達和鑒定.方法:採用RT-PCR方法,擴增mAb CAb-1的Fd片段和全長κ鏈基因,分彆剋隆到T載體後進行序列測定和分析.依次亞剋隆兩箇基因到噬粒pComb3中,去除該載體上的gIII基因,構建成分泌錶達載體Fd-L/pComb3.轉化XL1-Blue E.coli菌株,IPTG誘導錶達.採用ELISA和免疫熒光法檢測錶達產物的特異性.結果:剋隆瞭大腸癌mAb CAb-1的Fab基因,併在E.coli中穫得錶達.產物CAb-1 Fab具有與大腸癌細胞株SW480特異結閤的活性.結論:成功構建瞭在E.coli中錶達抗人大腸癌mAb CAb-1的小分子單價Fab抗體的載體.
목적:종잡교류세포중극륭mAb CAb-1소편마Fab항체기인,병재대장간균중진행표체화감정.방법:채용RT-PCR방법,확증mAb CAb-1적Fd편단화전장κ련기인,분별극륭도T재체후진행서렬측정화분석.의차아극륭량개기인도서립pComb3중,거제해재체상적gIII기인,구건성분비표체재체Fd-L/pComb3.전화XL1-Blue E.coli균주,IPTG유도표체.채용ELISA화면역형광법검측표체산물적특이성.결과:극륭료대장암mAb CAb-1적Fab기인,병재E.coli중획득표체.산물CAb-1 Fab구유여대장암세포주SW480특이결합적활성.결론:성공구건료재E.coli중표체항인대장암mAb CAb-1적소분자단개Fab항체적재체.
