第一军医大学学报
第一軍醫大學學報
제일군의대학학보
JOURNAL OF FIRST MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
2005年
1期
33-36
,共4页
李建娜%向开军%周荣%黄春华%丁勇强%曾其毅%钟秋平
李建娜%嚮開軍%週榮%黃春華%丁勇彊%曾其毅%鐘鞦平
리건나%향개군%주영%황춘화%정용강%증기의%종추평
SARS冠状病毒%S蛋白%DNA疫苗
SARS冠狀病毒%S蛋白%DNA疫苗
SARS관상병독%S단백%DNA역묘
目的探讨SARS冠状病毒的刺突(spike,S)蛋白的免疫学特性,以及S蛋白作为SARS-CoV病毒疫苗组分的可行性.方法将S蛋白基因分段克隆入原核表达载体pET-15b,并在大肠杆菌中表达,经过亲和层析得到纯化的重组蛋白rSa和rSb;将全长S基因克隆入真核分泌表达载体pSecTagB,得到重组DNA疫苗pSecS,免疫小鼠,得到SAS-CoVS蛋白抗血清.然后用纯化的重组蛋白rSa和rSb建立的SARS-CoV S抗体ELISA检测技术研究所构建的S-DNA疫苗的免疫效果.结果分段的重组蛋白rSa和rSb在大肠杆菌中均以可溶性形式得到高效表达,并能与SARS确诊病人血清以及pSecS免疫鼠血清发生特异性抗原抗体反应,原核表达的重组分段S蛋白具有SARS-CoV S蛋白相似的抗原性.结论原核表达的两段重组S蛋白有可能作为抗原组分用于临床SARS-CoV检测中;所构建的SARS-CoV的S基因核酸疫苗能在小鼠体内产生特异性抗体,这为进一步SARS DNA疫苗的研制提供一定的借鉴作用.
目的探討SARS冠狀病毒的刺突(spike,S)蛋白的免疫學特性,以及S蛋白作為SARS-CoV病毒疫苗組分的可行性.方法將S蛋白基因分段剋隆入原覈錶達載體pET-15b,併在大腸桿菌中錶達,經過親和層析得到純化的重組蛋白rSa和rSb;將全長S基因剋隆入真覈分泌錶達載體pSecTagB,得到重組DNA疫苗pSecS,免疫小鼠,得到SAS-CoVS蛋白抗血清.然後用純化的重組蛋白rSa和rSb建立的SARS-CoV S抗體ELISA檢測技術研究所構建的S-DNA疫苗的免疫效果.結果分段的重組蛋白rSa和rSb在大腸桿菌中均以可溶性形式得到高效錶達,併能與SARS確診病人血清以及pSecS免疫鼠血清髮生特異性抗原抗體反應,原覈錶達的重組分段S蛋白具有SARS-CoV S蛋白相似的抗原性.結論原覈錶達的兩段重組S蛋白有可能作為抗原組分用于臨床SARS-CoV檢測中;所構建的SARS-CoV的S基因覈痠疫苗能在小鼠體內產生特異性抗體,這為進一步SARS DNA疫苗的研製提供一定的藉鑒作用.
목적탐토SARS관상병독적자돌(spike,S)단백적면역학특성,이급S단백작위SARS-CoV병독역묘조분적가행성.방법장S단백기인분단극륭입원핵표체재체pET-15b,병재대장간균중표체,경과친화층석득도순화적중조단백rSa화rSb;장전장S기인극륭입진핵분비표체재체pSecTagB,득도중조DNA역묘pSecS,면역소서,득도SAS-CoVS단백항혈청.연후용순화적중조단백rSa화rSb건립적SARS-CoV S항체ELISA검측기술연구소구건적S-DNA역묘적면역효과.결과분단적중조단백rSa화rSb재대장간균중균이가용성형식득도고효표체,병능여SARS학진병인혈청이급pSecS면역서혈청발생특이성항원항체반응,원핵표체적중조분단S단백구유SARS-CoV S단백상사적항원성.결론원핵표체적량단중조S단백유가능작위항원조분용우림상SARS-CoV검측중;소구건적SARS-CoV적S기인핵산역묘능재소서체내산생특이성항체,저위진일보SARS DNA역묘적연제제공일정적차감작용.
