CAJ | 학술논문

目的:建立稳定转染HCV NS3的人源肝细胞系,探讨HCV NS3对肝细胞生物学特性的影响.方法:通过脂质体将HCV NS3的真核表达质粒稳定转染至QSG7701细胞(pRcHCNS3/QSG细胞),PCB,Western Blot,免疫组化检测基因的整合和表达;光学显微镜和电子显微镜观察转染前后细胞超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率变化;生长曲线,软琼脂集落实验,成瘤性实验探讨HCV NS3对肝细胞增殖的影响.结果:HCV NS3基因在pRcHCNS3/QSG细胞中得到整合和表达,定位于细胞浆.形态学显示出增殖旺盛的的特点,流式细胞仪检测pRcHCNS3/QSG细胞G0/G1期细胞数目减少而S期细胞数目增加,生长曲线和软琼脂集落实验表明pRcHCNS3/QSG细胞倍增时间明显缩短,停泊非依赖性生长能力明显增强,并能接种裸鼠成瘤,免疫组化证实肿瘤组织有HCV NS3蛋白表达.电镜和流式细胞仪检测显示HCV NS3能促进pRcHCNS3/QSG细胞凋亡.但其促增殖速度远大于凋亡率,表现为pRcHCNS3/QSG细胞获得恶性表型和致瘤性.结论:HCV NS3能明显促进人肝细胞QSG7701恶性转化,pRcHCNS3/QSG细胞可作为研究HCV NS3致癌机理的细胞模型.
목적:건립은정전염HCV NS3적인원간세포계,탐토HCV NS3대간세포생물학특성적영향.방법:통과지질체장HCV NS3적진핵표체질립은정전염지QSG7701세포(pRcHCNS3/QSG세포),PCB,Western Blot,면역조화검측기인적정합화표체;광학현미경화전자현미경관찰전염전후세포초미결구적개변;류식세포의검측세포주기화조망솔변화;생장곡선,연경지집락실험,성류성실험탐토HCV NS3대간세포증식적영향.결과:HCV NS3기인재pRcHCNS3/QSG세포중득도정합화표체,정위우세포장.형태학현시출증식왕성적적특점,류식세포의검측pRcHCNS3/QSG세포G0/G1기세포수목감소이S기세포수목증가,생장곡선화연경지집락실험표명pRcHCNS3/QSG세포배증시간명현축단,정박비의뢰성생장능력명현증강,병능접충라서성류,면역조화증실종류조직유HCV NS3단백표체.전경화류식세포의검측현시HCV NS3능촉진pRcHCNS3/QSG세포조망.단기촉증식속도원대우조망솔,표현위pRcHCNS3/QSG세포획득악성표형화치류성.결론:HCV NS3능명현촉진인간세포QSG7701악성전화,pRcHCNS3/QSG세포가작위연구HCV NS3치암궤리적세포모형.