中西医结合肝病杂志
中西醫結閤肝病雜誌
중서의결합간병잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE ON LIVER DISEASES
2008年
1期
27-31,前插1
,共6页
贺兴鄂%雷建华%杨旭%孙会卿%童明
賀興鄂%雷建華%楊旭%孫會卿%童明
하흥악%뢰건화%양욱%손회경%동명
肝炎,病毒,乙型%基因,X%三氧化二砷%HepG2细胞%RNA干扰%细胞凋亡
肝炎,病毒,乙型%基因,X%三氧化二砷%HepG2細胞%RNA榦擾%細胞凋亡
간염,병독,을형%기인,X%삼양화이신%HepG2세포%RNA간우%세포조망
目的:应用shRNA(短发夹状RNA)介导的RNA干扰研究HBV X基因表达对三氧化二砷(As2O3)诱导HepG2细胞凋亡特性的影响.方法:用噻唑蓝(MTT)还原法分析经2.0μmol/L As2O3处理的HepG2细胞和表达HBV X基因的HepG2-X细胞的生长抑制率.以未处理细胞为对照,流式细胞术分析细胞凋亡比和细胞周期,采用Caspase3/cpp32活性比色试剂盒测定As2O3处理后细胞裂解物中Caspase3的活性.应用脂质体介导HBX序列特异性shRNA表达载体pXi-1、pXi-2和序列无关对照pXi-3转染HepG2-X,再次分析细胞凋亡比、细胞周期和Caspase3活性的变化.结果:MTT法表明2.0μmol/L As2O3处理36小时具有理想的细胞生长抑制率.As2O3作用后细胞凋亡比明显增高(P＜0.05),G2/M期细胞增多(P＜0.05).不同HBV X基因表达水平的细胞As2O3诱导的细胞凋亡比有统计学差异(P＜0.05),HepG2-X与HepG2比较,其As2O3诱导的细胞凋亡比下降,且细胞裂解物的Caspase3活性下降(P＜0.05),但应用序列特异性shRNA抑制HBV X基因表达后凋亡比和Caspase3活性可再次增高,而作为对照的序列无关的shRNA则无此效应,但这种效应与细胞周期无关.结论:As2O3可诱导HepG2细胞凋亡.表达HBV X基因后As2O3诱导的HepG2细胞凋亡比和Caspas3活性下降,特异性shRNA抑制HBV X基因表达后则无此效应,但这种效应与细胞周期无关.
目的:應用shRNA(短髮夾狀RNA)介導的RNA榦擾研究HBV X基因錶達對三氧化二砷(As2O3)誘導HepG2細胞凋亡特性的影響.方法:用噻唑藍(MTT)還原法分析經2.0μmol/L As2O3處理的HepG2細胞和錶達HBV X基因的HepG2-X細胞的生長抑製率.以未處理細胞為對照,流式細胞術分析細胞凋亡比和細胞週期,採用Caspase3/cpp32活性比色試劑盒測定As2O3處理後細胞裂解物中Caspase3的活性.應用脂質體介導HBX序列特異性shRNA錶達載體pXi-1、pXi-2和序列無關對照pXi-3轉染HepG2-X,再次分析細胞凋亡比、細胞週期和Caspase3活性的變化.結果:MTT法錶明2.0μmol/L As2O3處理36小時具有理想的細胞生長抑製率.As2O3作用後細胞凋亡比明顯增高(P＜0.05),G2/M期細胞增多(P＜0.05).不同HBV X基因錶達水平的細胞As2O3誘導的細胞凋亡比有統計學差異(P＜0.05),HepG2-X與HepG2比較,其As2O3誘導的細胞凋亡比下降,且細胞裂解物的Caspase3活性下降(P＜0.05),但應用序列特異性shRNA抑製HBV X基因錶達後凋亡比和Caspase3活性可再次增高,而作為對照的序列無關的shRNA則無此效應,但這種效應與細胞週期無關.結論:As2O3可誘導HepG2細胞凋亡.錶達HBV X基因後As2O3誘導的HepG2細胞凋亡比和Caspas3活性下降,特異性shRNA抑製HBV X基因錶達後則無此效應,但這種效應與細胞週期無關.
목적:응용shRNA(단발협상RNA)개도적RNA간우연구HBV X기인표체대삼양화이신(As2O3)유도HepG2세포조망특성적영향.방법:용새서람(MTT)환원법분석경2.0μmol/L As2O3처리적HepG2세포화표체HBV X기인적HepG2-X세포적생장억제솔.이미처리세포위대조,류식세포술분석세포조망비화세포주기,채용Caspase3/cpp32활성비색시제합측정As2O3처리후세포렬해물중Caspase3적활성.응용지질체개도HBX서렬특이성shRNA표체재체pXi-1、pXi-2화서렬무관대조pXi-3전염HepG2-X,재차분석세포조망비、세포주기화Caspase3활성적변화.결과:MTT법표명2.0μmol/L As2O3처리36소시구유이상적세포생장억제솔.As2O3작용후세포조망비명현증고(P＜0.05),G2/M기세포증다(P＜0.05).불동HBV X기인표체수평적세포As2O3유도적세포조망비유통계학차이(P＜0.05),HepG2-X여HepG2비교,기As2O3유도적세포조망비하강,차세포렬해물적Caspase3활성하강(P＜0.05),단응용서렬특이성shRNA억제HBV X기인표체후조망비화Caspase3활성가재차증고,이작위대조적서렬무관적shRNA칙무차효응,단저충효응여세포주기무관.결론:As2O3가유도HepG2세포조망.표체HBV X기인후As2O3유도적HepG2세포조망비화Caspas3활성하강,특이성shRNA억제HBV X기인표체후칙무차효응,단저충효응여세포주기무관.
