川北医学院学报
川北醫學院學報
천북의학원학보
JOURNAL OF NORTH SICHUAN MEDICAL COLLEGE
2008年
6期
560-563
,共4页
波形蛋白%中间丝%质粒%人肝细胞癌细胞株
波形蛋白%中間絲%質粒%人肝細胞癌細胞株
파형단백%중간사%질립%인간세포암세포주
目的 构建重组人波形蛋白中间丝真核表达质粒载体pcDNA3.1-VIM并检测波形蛋白在肝癌HepG2细胞中的稳定表达.方法 通过RT-PCR技术从人胎盘组织总RNA中扩增波形蛋白基因,经限制性核酸内切酶BamHⅠ-EcoRⅠ消化,然后插入pcDNA3.1(+)载体,脂质体介导重组质粒和空质粒分别转染HepG2细胞,G418筛选稳定表达细胞株,采用免疫细胞化学技术检测目的基因的表达.结果 经DNA序列分析和限制性核酸内切酶消化,证实重组载体pcDNA3.1-VIM已正确克隆,建立的稳定细胞株高表达波形蛋白.结论 成功地构建了重组质粒pcDNA3.1-VIM载体和建立了稳定表达波形蛋白的人肝细胞癌细胞株,为进一步研究波形蛋白与癌细胞生物学行为之间的相互关系奠定了基础.
目的 構建重組人波形蛋白中間絲真覈錶達質粒載體pcDNA3.1-VIM併檢測波形蛋白在肝癌HepG2細胞中的穩定錶達.方法 通過RT-PCR技術從人胎盤組織總RNA中擴增波形蛋白基因,經限製性覈痠內切酶BamHⅠ-EcoRⅠ消化,然後插入pcDNA3.1(+)載體,脂質體介導重組質粒和空質粒分彆轉染HepG2細胞,G418篩選穩定錶達細胞株,採用免疫細胞化學技術檢測目的基因的錶達.結果 經DNA序列分析和限製性覈痠內切酶消化,證實重組載體pcDNA3.1-VIM已正確剋隆,建立的穩定細胞株高錶達波形蛋白.結論 成功地構建瞭重組質粒pcDNA3.1-VIM載體和建立瞭穩定錶達波形蛋白的人肝細胞癌細胞株,為進一步研究波形蛋白與癌細胞生物學行為之間的相互關繫奠定瞭基礎.
목적 구건중조인파형단백중간사진핵표체질립재체pcDNA3.1-VIM병검측파형단백재간암HepG2세포중적은정표체.방법 통과RT-PCR기술종인태반조직총RNA중확증파형단백기인,경한제성핵산내절매BamHⅠ-EcoRⅠ소화,연후삽입pcDNA3.1(+)재체,지질체개도중조질립화공질립분별전염HepG2세포,G418사선은정표체세포주,채용면역세포화학기술검측목적기인적표체.결과 경DNA서렬분석화한제성핵산내절매소화,증실중조재체pcDNA3.1-VIM이정학극륭,건립적은정세포주고표체파형단백.결론 성공지구건료중조질립pcDNA3.1-VIM재체화건립료은정표체파형단백적인간세포암세포주,위진일보연구파형단백여암세포생물학행위지간적상호관계전정료기출.
