农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2009年
3期
393-397
,共5页
索永兵%樊树芳%邓国华%温峰琴%希尼尼根%陈化兰
索永兵%樊樹芳%鄧國華%溫峰琴%希尼尼根%陳化蘭
색영병%번수방%산국화%온봉금%희니니근%진화란
H5Nl%禽流感病毒%反向遗传%生物学特性
H5Nl%禽流感病毒%反嚮遺傳%生物學特性
H5Nl%금류감병독%반향유전%생물학특성
从含A/duck/FuJian/01/02(W-DKFJ)株病毒的鸡胚尿囊液中提取总RNA,用RT-PCR扩增PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS全基因片段,将其分别克隆至PBD载体中.利用8质粒反向遗传操作系统,将重组的PBD质粒共转染293T细胞,成功拯救了该病毒.并命名为R-DKFJ.10(6)EID(50)的W-DKFJ和R-DKFJ分别经鼻腔接种BALB/c小鼠后,观察到两组小鼠体重均明显下降,并且在10d之内全部死亡.与此同时,在感染小鼠后第3天在脑、脾、肾、肺脏等脏器巾分离到病毒,两组小鼠肺脏病毒含量分别为7.4±0.4和7.1±0.1.其MLD(50)分别为O.5log(10)EID(50)/ML和0.98lOg(10)EID/mL.结果表明,救获病毒R-DKFJ与其亲本野生毒W-DKFJ在对哺乳动物模型BALB/c小鼠致病性方面保持着一致的生物学特性.
從含A/duck/FuJian/01/02(W-DKFJ)株病毒的鷄胚尿囊液中提取總RNA,用RT-PCR擴增PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS全基因片段,將其分彆剋隆至PBD載體中.利用8質粒反嚮遺傳操作繫統,將重組的PBD質粒共轉染293T細胞,成功拯救瞭該病毒.併命名為R-DKFJ.10(6)EID(50)的W-DKFJ和R-DKFJ分彆經鼻腔接種BALB/c小鼠後,觀察到兩組小鼠體重均明顯下降,併且在10d之內全部死亡.與此同時,在感染小鼠後第3天在腦、脾、腎、肺髒等髒器巾分離到病毒,兩組小鼠肺髒病毒含量分彆為7.4±0.4和7.1±0.1.其MLD(50)分彆為O.5log(10)EID(50)/ML和0.98lOg(10)EID/mL.結果錶明,救穫病毒R-DKFJ與其親本野生毒W-DKFJ在對哺乳動物模型BALB/c小鼠緻病性方麵保持著一緻的生物學特性.
종함A/duck/FuJian/01/02(W-DKFJ)주병독적계배뇨낭액중제취총RNA,용RT-PCR확증PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M화NS전기인편단,장기분별극륭지PBD재체중.이용8질립반향유전조작계통,장중조적PBD질립공전염293T세포,성공증구료해병독.병명명위R-DKFJ.10(6)EID(50)적W-DKFJ화R-DKFJ분별경비강접충BALB/c소서후,관찰도량조소서체중균명현하강,병차재10d지내전부사망.여차동시,재감염소서후제3천재뇌、비、신、폐장등장기건분리도병독,량조소서폐장병독함량분별위7.4±0.4화7.1±0.1.기MLD(50)분별위O.5log(10)EID(50)/ML화0.98lOg(10)EID/mL.결과표명,구획병독R-DKFJ여기친본야생독W-DKFJ재대포유동물모형BALB/c소서치병성방면보지착일치적생물학특성.
