江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2009年
6期
472-474,479
,共4页
袁利学%刘洋%步雪峰%郑金旭%严玉兰
袁利學%劉洋%步雪峰%鄭金旭%嚴玉蘭
원리학%류양%보설봉%정금욱%엄옥란
白细胞介素-28%大肠埃希菌%蛋白质纯化%抗体制备
白細胞介素-28%大腸埃希菌%蛋白質純化%抗體製備
백세포개소-28%대장애희균%단백질순화%항체제비
目的: 获取重组鼠IL-28(mIL-28)纯化蛋白,制备多克隆抗体.方法: 用PCR技术扩增鼠IL-28成熟蛋白的编码序列,克隆入原核表达载体pET-30,构建融合表达载体pET-30a-mIL-28,转化大肠埃希菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达IL-28融合蛋白,经镍柱亲和层析纯化,然后免疫6～8周龄鸡,制备多克隆抗体,采用ELISA 检测抗体效价.结果: 成功构建了表达载体pET-30a-mIL-28,DNA序列测定结果与预期结果一致.在37℃培养条件下,IPTG诱导表达的IL-28融合蛋白进行SDS-PAGE电泳分析,发现其与融合蛋白的理论计算值一致,免疫鸡后收获抗血清, ELISA 显示抗体效价具有高度特异性.结论: 获得了重组鼠IL-28纯化蛋白,制备了鼠IL-28多克隆抗体,为进一步深入研究IL-28的生物活性及其应用打下基础.
目的: 穫取重組鼠IL-28(mIL-28)純化蛋白,製備多剋隆抗體.方法: 用PCR技術擴增鼠IL-28成熟蛋白的編碼序列,剋隆入原覈錶達載體pET-30,構建融閤錶達載體pET-30a-mIL-28,轉化大腸埃希菌BL21(DE3),以IPTG誘導錶達IL-28融閤蛋白,經鎳柱親和層析純化,然後免疫6～8週齡鷄,製備多剋隆抗體,採用ELISA 檢測抗體效價.結果: 成功構建瞭錶達載體pET-30a-mIL-28,DNA序列測定結果與預期結果一緻.在37℃培養條件下,IPTG誘導錶達的IL-28融閤蛋白進行SDS-PAGE電泳分析,髮現其與融閤蛋白的理論計算值一緻,免疫鷄後收穫抗血清, ELISA 顯示抗體效價具有高度特異性.結論: 穫得瞭重組鼠IL-28純化蛋白,製備瞭鼠IL-28多剋隆抗體,為進一步深入研究IL-28的生物活性及其應用打下基礎.
목적: 획취중조서IL-28(mIL-28)순화단백,제비다극륭항체.방법: 용PCR기술확증서IL-28성숙단백적편마서렬,극륭입원핵표체재체pET-30,구건융합표체재체pET-30a-mIL-28,전화대장애희균BL21(DE3),이IPTG유도표체IL-28융합단백,경얼주친화층석순화,연후면역6～8주령계,제비다극륭항체,채용ELISA 검측항체효개.결과: 성공구건료표체재체pET-30a-mIL-28,DNA서렬측정결과여예기결과일치.재37℃배양조건하,IPTG유도표체적IL-28융합단백진행SDS-PAGE전영분석,발현기여융합단백적이론계산치일치,면역계후수획항혈청, ELISA 현시항체효개구유고도특이성.결론: 획득료중조서IL-28순화단백,제비료서IL-28다극륭항체,위진일보심입연구IL-28적생물활성급기응용타하기출.
