中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2010年
7期
743-747
,共5页
许建华%邓皖利%范忠泽%孙珏%张勇%梁芳%韩建宏%李朝衡
許建華%鄧皖利%範忠澤%孫玨%張勇%樑芳%韓建宏%李朝衡
허건화%산환리%범충택%손각%장용%량방%한건굉%리조형
肠胃清%多药耐药%结肠癌%Y盒结合蛋白
腸胃清%多藥耐藥%結腸癌%Y盒結閤蛋白
장위청%다약내약%결장암%Y합결합단백
目的 观察肠胃清对长春新碱诱导的人结肠癌耐药细胞株HCT8/V的Y盒结合蛋白(YB-1)核移位、多药耐药基因MDR1及P-糖蛋白(P-gp)表达的影响,进一步探讨该方逆转肿瘤多药耐药的分子机制.方法 制备大鼠灌胃后的肠胃清药物血清,以Western blot方法检测肠胃清药物血清作用下HCTS/V细胞胞浆、胞核YB-1表达情况,EMSA法分析YB-1与MDR1基因启动子结合活性,RT-PCR检测MDR1、YB-1、多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA转录水平,流式细胞仪检测细胞膜表面P-gP表达.结果 在1.25%、2.5%、5%药物血清作用下,HCT8/V细胞核内YB-1表达逐渐减弱,细胞质内YB-1表达则逐渐增强;YB-1与MDR1基因启动子结合活性逐渐下降(P<0.01);MDR1 mRNA转录水平逐渐降低(P<0.05,P<0.01),YB-1和MRP mRNA的水平无明显变化(P>0.05);细胞膜表面P-gP表达荧光强度值减弱(P<0.05,P<0.01).结论 肠胃清可通过影响耐药细胞YB-1的核移位、降低MDR1/P-gP的表达,逆转结肠癌细胞的耐药.
目的 觀察腸胃清對長春新堿誘導的人結腸癌耐藥細胞株HCT8/V的Y盒結閤蛋白(YB-1)覈移位、多藥耐藥基因MDR1及P-糖蛋白(P-gp)錶達的影響,進一步探討該方逆轉腫瘤多藥耐藥的分子機製.方法 製備大鼠灌胃後的腸胃清藥物血清,以Western blot方法檢測腸胃清藥物血清作用下HCTS/V細胞胞漿、胞覈YB-1錶達情況,EMSA法分析YB-1與MDR1基因啟動子結閤活性,RT-PCR檢測MDR1、YB-1、多藥耐藥相關蛋白(MRP)mRNA轉錄水平,流式細胞儀檢測細胞膜錶麵P-gP錶達.結果 在1.25%、2.5%、5%藥物血清作用下,HCT8/V細胞覈內YB-1錶達逐漸減弱,細胞質內YB-1錶達則逐漸增彊;YB-1與MDR1基因啟動子結閤活性逐漸下降(P<0.01);MDR1 mRNA轉錄水平逐漸降低(P<0.05,P<0.01),YB-1和MRP mRNA的水平無明顯變化(P>0.05);細胞膜錶麵P-gP錶達熒光彊度值減弱(P<0.05,P<0.01).結論 腸胃清可通過影響耐藥細胞YB-1的覈移位、降低MDR1/P-gP的錶達,逆轉結腸癌細胞的耐藥.
목적 관찰장위청대장춘신감유도적인결장암내약세포주HCT8/V적Y합결합단백(YB-1)핵이위、다약내약기인MDR1급P-당단백(P-gp)표체적영향,진일보탐토해방역전종류다약내약적분자궤제.방법 제비대서관위후적장위청약물혈청,이Western blot방법검측장위청약물혈청작용하HCTS/V세포포장、포핵YB-1표체정황,EMSA법분석YB-1여MDR1기인계동자결합활성,RT-PCR검측MDR1、YB-1、다약내약상관단백(MRP)mRNA전록수평,류식세포의검측세포막표면P-gP표체.결과 재1.25%、2.5%、5%약물혈청작용하,HCT8/V세포핵내YB-1표체축점감약,세포질내YB-1표체칙축점증강;YB-1여MDR1기인계동자결합활성축점하강(P<0.01);MDR1 mRNA전록수평축점강저(P<0.05,P<0.01),YB-1화MRP mRNA적수평무명현변화(P>0.05);세포막표면P-gP표체형광강도치감약(P<0.05,P<0.01).결론 장위청가통과영향내약세포YB-1적핵이위、강저MDR1/P-gP적표체,역전결장암세포적내약.
